Taq DNA連接酶

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商品介紹：

描述：Taq DNA 連接酶是一種熱穩(wěn)定性連接酶，能夠催化 磷酸二酯鍵的形成，使與同一互補靶 DNA 鏈雜交的兩條相 鄰寡核苷酸鏈的 5′-磷酸末端和 3′-羥基末端通過磷酸二酯 鍵相連。該連接反應(yīng)只有當兩條寡核苷酸鏈與互補靶 DNA 配對，并且兩條寡核苷酸鏈之間沒有空隙的條件下才可 發(fā)生。因此，可以用它來檢測單堿基替換。在 45℃-65℃ 范 圍內(nèi)，Taq DNA 連接酶均有活性。該酶在 1XHiFi Taq Ligase Buffer 中具有的保真性連接。

組分

應(yīng)用
雙鏈 DNA 切刻的修復
儲存：-20℃可保存半年，長期儲存請置于 -70℃。
活性定義：1 單位指 50μl 反應(yīng)體系中，45℃ 條件下，15 分鐘內(nèi)能使 50% 的 1μg 經(jīng) BstEII 消化的 λDNA 片段（12bp 粘性末端）發(fā)生連接所需要的酶量。該酶也可以使用 1×Taq DNA Ligase Buffer20 mM Tris-HCl（pH 7.6），25 mM KAc，10 mM Mg(Ac)2，10 mM DTT，1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100，45℃ 溫育。 該酶需 NAD+ 作輔因子，在 10×Taq DNA 連接酶緩沖液中已添加 NAD+；為了延長 NAD+ 的半衰期，緩沖液應(yīng)于 -70℃ 貯存。
使用方法
1、配制如下反應(yīng)體系
DNA up to 1 µg
10×HiFi Taq Ligase Buffer 5 µl
Taq DNA Ligase 2 µl
滅菌水 up to 50 µl
2、45℃孵育 15min。

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