當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>> 剛果嗜皮菌熒光定量PCR試劑盒探針法
產地 | 國產 | 加工定制 | 否 |
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適用領域 | 科研 | 貨號 | BJ-P9483 |
操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
剛果嗜皮菌熒光定量PCR試劑盒探針法 | Dermatophilus congolensis | 多種規(guī)格 | BJ-P9483 |
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。 2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。 3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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伊紅染液100ml
姬姆薩染液(10×)25ml
DiOC6(3)碘化物3,3’-Dihexyloxacarbocyanine iodide10mg
高爾基體綠色熒光探針GolgiGreen200μg
內質網紅色熒光探針(ER-Tracker Red)20μL
茜素紅染色試劑盒(ph8.3)Mordant Red 310ml
溶酶體藍色熒光探針LysoBlue200μL
神經元示蹤劑—核黃Nuclear Yellow(Hoechst S769121)10mg
尼氏小體染色液Nissl body Staining Solution100ml
剛果紅(β-淀粉樣蛋白染料)10mg
剛果嗜皮菌熒光定量PCR試劑盒探針法食蟹猴 LTB 基因全長ORF克隆海洋動物(蝦貝類)活性線粒體分離試劑盒 10/50次
食蟹猴 TNFSF8 基因全長ORF克隆海洋動物(蝦貝類)高質純化線粒體分離試劑盒 10次
食蟹猴 TNFSF14 基因全長ORF克隆活體細胞線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒 20次
食蟹猴 CD70 基因全長ORF克隆純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒 20次
食蟹猴 TNFSF4 基因全長ORF克隆純化線粒體膜通道孔(MPTP)比色法檢測試劑盒 20次
食蟹猴 FGF10 基因全長ORF克隆冰凍切片組織線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒 50次
食蟹猴 LTA 基因全長ORF克隆純化線粒體凍存液(學和膜結構保護) 50毫升
食蟹猴 IGFBP1 基因全長ORF克隆純化線粒體凍存液(生物能量學保護) 50毫升
食蟹猴 IGFBP3 基因全長ORF克隆純化線粒體II型L-3羥?;?/span>CoA 脫氫/β淀粉樣蛋白結合乙醇脫氫(HADHII/ABAD)活性比色法定量檢測試劑盒 20次
食蟹猴 IGFBP2 基因全長ORF克隆細胞II型L-3羥酰基-CoA 脫氫/β淀粉樣蛋白結合乙醇脫氫(HADHII/ABAD)活性比色法定量檢測試劑盒 20次
食蟹猴 IGF1R 基因全長ORF克隆組織II型L-3羥?;?/span>CoA 脫氫/β淀粉樣蛋白結合乙醇脫氫(HADHII/ABAD)活性比色法定量檢測試劑盒 20次
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