產(chǎn)品名稱：人膚蠅熒光定量PCR試劑盒探針法

英文名稱：Dermatobia hominis

貨號(hào):BJ-P9482

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

運(yùn)輸：低溫

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

實(shí)驗(yàn)外包:

基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、使用方法:

特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

儲(chǔ)存條件：-20℃以下，有效期12個(gè)月。

一、樣品 DNA 的制備

用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。

二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。

3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。

4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。

5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。

6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。

7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。

8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

抗酒石酸酸性磷酸酶染液20T

快速瑞氏染液250ml×3

油紅染色試劑盒100T

茜素紅染色液(ph4.2)10ml

瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液250ml×3

BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit共100ml

MASSON三色染色試劑盒(亮綠，用于膠原纖維染色)8ml/瓶/盒

蘇木素染液Haematorylin Staining Solution100ml

結(jié)晶紫染色液100ml

蘇木素-伊紅(H-E)染液200ml

人膚蠅熒光定量PCR試劑盒探針法食蟹猴 TNFRSF17 基因全長(zhǎng)ORF克隆動(dòng)物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒  20次

食蟹猴 TNFRSF1B 基因全長(zhǎng)ORF克隆線粒體呼吸鏈復(fù)合物I（NADH－輔Q還原）活性定量檢測(cè)試劑盒  20次

食蟹猴 LTBR 基因全長(zhǎng)ORF克隆線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（琥珀酸－輔Q還原）  20次

食蟹猴 TNFRSF10D / TRAILR4 基因全長(zhǎng)ORF克隆活性定量檢測(cè)試劑盒  

食蟹猴 TNFRSF1A 基因全長(zhǎng)ORF克隆線粒體呼吸鏈復(fù)合物III（輔Q－還原）  20次

食蟹猴 TNFSF10 基因全長(zhǎng)ORF克隆活性定量檢測(cè)試劑盒  （10樣本）

食蟹猴 CD40 基因全長(zhǎng)ORF克隆線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV（正鐵－氧化還原）  20次

食蟹猴 CD40LG 基因全長(zhǎng)ORF克隆活性定量檢測(cè)試劑盒  

食蟹猴 TNFSF13 基因全長(zhǎng)ORF克隆線粒體呼吸鏈復(fù)合物V（F0F1-ATP/ATP合成）  20次

食蟹猴 TNFSF12 基因全長(zhǎng)ORF克隆活性定量檢測(cè)試劑盒  （10樣本）

食蟹猴 FGF14 基因全長(zhǎng)ORF克隆海洋動(dòng)物（蝦貝類）線粒體粗提分離試劑盒  10/50次