一、樣品 DNA 的制備

用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。

二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。

1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。

3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。

4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。

5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。

6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。

7. NC 管中不加任何陽性對照。

8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。

服務流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。

產品名稱：多殺巴斯德菌熒光定量PCR試劑盒探針法

英文名稱：Pasteurella multocida

貨號:BJ-P9912

產品運輸：低溫運輸

產品保存：-20℃保存

產品有效期：一年

運輸：低溫

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

實驗外包:

基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:

實驗外包:

1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構建

特點優(yōu)勢：

1. 特異性：所有產品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。

免疫血清防腐劑(10×,熒光抗體用)50ml

免疫血清防腐劑(10×)50ml

BCIP/NBT顯色試劑盒BCIP/NBT Chromogen Kit25ml|125ml

免疫組化檢測試劑盒(POD顯色)(小鼠IgG)SABC Kit-POD(Mouse IgG)100T-200T

彩色顯影液100ml

免疫組化檢測試劑盒(AP顯色)(小鼠IgG)SABC Kit-AP(Mouse IgG)100T-200T

免疫組化熒光檢測試劑盒(兔源一抗)SABC Kit-FITC(Rabbit IgG)100T-200T

兔源一抗免疫組化檢測試劑盒(FITC熒光+DAB顯色)SABC Kit-FITC(POD)(Rabbit IgG)100T-200T

氯化硝基四氮唑蘭(NBT)Nitroblue tetrazolium chloride100mg

免疫組化SP法檢測試劑盒(小鼠/兔IgG)SP Kit(Broad Spectrum)3ml|6ml|18ml|110ml

多殺巴斯德菌熒光定量PCR試劑盒探針法人 LCN1 / VEGP / Lipocalin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)血液組織蛋白L（CATHEPSIN L）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 MANF / ARMET 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)體液組織蛋白L（CATHEPSIN L）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 CDH5 / Cadherin-5 / CD144 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)細胞組織蛋白K（CATHEPSIN K）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

小鼠 CEACAM1 / CD66a 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)組織樣品組織蛋白K（CATHEPSIN K）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

小鼠 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)細胞組織蛋白B（CATHEPSIN B）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 CRTAM 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)組織樣品組織蛋白B（CATHEPSIN B）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 LRP1 / A2MR / CD91 (aa 786-1165) 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)血液樣品組織蛋白B（CATHEPSIN B）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 ICOSLG / B7-H2 / ICOSL / CD275 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)體液樣品組織蛋白B（CATHEPSIN B）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)細胞組織蛋白D（CATHEPSIN D）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)組織樣品組織蛋白D（CATHEPSIN D）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

小鼠 CD2 / LY37 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)細胞組織蛋白H（CATHEPSIN H）活性比色法定量檢測試劑盒  20次