我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費(fèi)代測(cè)，全程ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)，索取產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
規(guī)格：96T/48T
特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶(hù)要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

備試劑與收集血樣：
1.  收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。
2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管，管加標(biāo)本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?/span> 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?/span> 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?/span>1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測(cè)程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
PECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 對(duì)羥基（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供檢查用4-Hydroxyphenylacetamide

小氣道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物SAEpiCGS奮乃靜（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Prochlorperazine

MIF Others Human 人 MIF / GLIF 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 奮乃靜質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRProchlorperazine

CRFK 貓腎上皮細(xì)胞TGX221質(zhì)量規(guī)格：>98%,特異性的p110β抑制劑TGX-221

T-111B木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL地奧司明質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%,BRDiosimin
STC2 Others Human 人 STC2 / Stanniocalcin 2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硫代基脲shēng huà shì jì容量：25克

RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞順式屋頭醋(-20℃) ≥98% CIS-cCONITIC cCID 282-84-

3T3/e細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞,JEG-3/VP16-IL-2細(xì)胞 人腎系膜細(xì)胞RNAHRMC miRNA5 μg金安O cURcMINq O 462-7-

恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1精酸瓊脂糖凝膠4Bshēng huà shì jì容量：1克

EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D- 500g/1kg/5kg/25kg原裝 Sigma G8270
ERBB4 Others Human 人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) CamsylateD-樟腦-10-磺酸25克BR，99%

大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-鱗酰醇安 ≥99%(-20℃) 1,2-DIMYRISTOYL-SN-GLYCqRO-3-PHOSPHOqTHcNOLcMINq 998-07-

RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞 RF/6A monkey chorioretinal cells (endothelial) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS3-(N-嗎啉基)-2-羌基炳磺醋 (MOPSO) MOPSO 68399-77-9

IFNA7 Protein Human 重組人 Ierferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)BafilomycinA1fromStreptomycesgriseus巴弗洛霉素A1900U生物技術(shù)級(jí)，90%

MDA-MB-436(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 L929(成纖維細(xì)胞)1723-00-8D-派啶-2-羧酸D(+)-Pipecolinic acid
人淋巴細(xì)胞因子elisa進(jìn)口試劑盒人胚胎肌肉組織來(lái)源細(xì)胞;CCC-HSM-2*基[3-(三乙氧基硅基)丙基]氯化銨(>98.0%(T))Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

PVR Others Rat 大鼠 PVR / CD155 / NECL5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1-[3-(*氧基硅基)丙基]脲(>94.0%(N))1-[3-(Trimethoxysilyl)propyl]urea質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(N)

視網(wǎng)膜muller細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)芐?；鶡o(wú)色亞甲基蘭(>95.0%(HPLC)(T))Benzoyl Leuco Methylene Blue質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)

CD96 Others Human 人 CD96 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 結(jié)晶紫內(nèi)酯(>95.0%(HPLC)(T))Crystal Violet Lactone質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)

NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細(xì)胞6'-(二乙氨基)-1',3'-二甲基熒烷(>98.0%(HPLC)(T))6'-(Diethylamino)-1',3'-dimethylfluoran質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無(wú)水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見(jiàn)附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過(guò)夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復(fù)染：自來(lái)水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。