海豹分支桿菌PCR熒光定量檢測試劑盒-上海邦景實業(yè)有限公司

產地	國產	加工定制	否
適用領域	科研	貨號	BJ-P7021

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產品名稱	英文名稱	規(guī)格	貨號
海豹分支桿菌PCR熒光定量檢測試劑盒	Mycobacterium pinnipediiPCR	多種規(guī)格	BJ-P7021

QQ截圖20191204143322.jpg

實驗外包:

1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質檢測：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構建

特點優(yōu)勢：

1. 特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數(shù)據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。

2. 重現(xiàn)性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。

3. 靈敏性：該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer 5μl

dNTP mixl 4μl

引物1（10pM） 2μl

引物2（10PM） 2μl

Taq酶（2U/μl） 1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

三、注意事項

１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。

２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。

３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。

操作流程

1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。

3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。

4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。

5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。

6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。

7. 儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。

9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

250mL Regular Washing Solution,5X Regular Washing Solution,5X 常溫保存高鹽察氏培養(yǎng)基進口、國產Salt Czapek Dox Agar250克用于霉菌和酵母菌的計數(shù)

5mL 內毒素清除專用親和介質 Endotoxin Removal Resin 4℃保存

支原體培養(yǎng)基基礎（含） Mycoplasma Broth Base 250g 0.156-10 ng/mL 人Ⅹ(F10)ELISA試劑盒

1瓶 HuH-7株 HuH-7 低溫運輸和保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Proenkephalin-B

2 ug pET-41 Ek/LIC pET-41 Ek/LIC 低溫運輸，-20℃保存

1瓶 S-180株 S-180 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL. ELISA Kit for Human Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase

營養(yǎng)肉湯 Lysozyme Nutrient Broth 250g 0.94-60 ng/mL ELISA Kit for Human Matrix extracellular phosphoglycoprotein

50T 人博卡病毒PCR檢測試劑盒低溫運輸，-20℃保存 0.625-40 ng/ml ELISA Kit for Human Pro-epidermal growth factor

500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH7.4 Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH7.4 常溫保存麥芽糖發(fā)酵管進口、國產麥芽糖發(fā)酵管20支BR

2 ug pGAD53m pGAD53m 低溫運輸，-20℃保存游離測定培養(yǎng)基進口、國產Free Biotin Assay Medium用于嬰兒食品和乳粉中游離測定250

1mL 長效期SDS-PAGE上樣液 Stable SDS-PAGE Loading Buffer -20℃保存 1.57-100 ng/mL 人無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)ELISA試劑盒

海豹分支桿菌PCR熒光定量檢測試劑盒Tenofovir Disoproxil 核苷酸逆轉錄酶抑制劑(Tenofovir Disoproxil) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

BGB-283 Raf激酶和EGFR抑制劑(BGB-283) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

Givinostat hydrochloride monohydrate HDAC抑制劑（Givinostat hydrochloride monohydrate） 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

Indole-3-carbinol AhR激動劑(Indole-3-carbinol) 1mL(10mM)|200mg|1g

CAY10505 PI3Kγ抑制劑(CAY10505) 1mL(10mM)|10mg|25mg|50mg|100mg

Osilodrostat 人11β-羥化酶和醛固酮合成酶抑制劑(Osilodrostat) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

alpha-Mangostin IDH1-R132H抑制劑（alpha-Mangostin） 1mL(10mM)|10mg|25mg|50mg|100mg

EDO-S101 HDAC抑制劑(EDO-S101) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

SC-560 COX-1抑制劑(SC-560) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

CRT0066101 dihydrochloride PKD抑制劑（CRT0066101 dihydrochloride） 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg