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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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幼蟲芽孢桿菌熒光定量PCR試劑盒探針法

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-07-18 14:30:05瀏覽次數(shù):126次

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產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn) 加工定制
適用領(lǐng)域 科研 貨號(hào) BJ-P9905
幼蟲芽孢桿菌熒光定量PCR試劑盒探針法公司正在出售的產(chǎn)品:10次 克必隆eTS miRNA RT-PCR試劑盒 125mL NP40 Lysis Buffer,2X(NP40裂解液,2X) NP40 Lysis Buffer,2X 常溫保存10ug M13mp 18 DNA(雙鏈) M13mp18 DNA -20℃保存2 ug pAP1(PMA)-Luc pAP1(PMA)-Luc 低溫運(yùn)輸,

操作流程

1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。

3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。

4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。

6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。

9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

貨號(hào)

幼蟲芽孢桿菌熒光定量PCR試劑盒探針法

Paenibacillus larvae

多種規(guī)格

BJ-P9905

2.jpg

特點(diǎn):

1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

儲(chǔ)存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。

PCR檢測(cè)試劑盒 (2).jpg



實(shí)驗(yàn)過(guò)程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

 

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物110pM              2μl

引物210PM             2μl

Taq酶(2U/μl           1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

ddH2O              50 μl

PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

三、注意事項(xiàng)

1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。

2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。

3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。

4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。

5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。

 

 

SA緩沖液(1×,pH7.4)500ml

Tris-Maleate緩沖液(1mol/L,pH6.5-8.5)100ml|500ml

Tris-Maleate緩沖液(0.1mol/L,pH5.08-8.45)500ml

TBS緩沖液(0.05mol/L,pH7.4)500ml

Tris-Maleate緩沖液(0.2mol/L,pH5.08-8.45)500ml

TBS緩沖液(0.02mol/L,pH8.2)500ml

Sorensen磷酸緩沖液(10×,pH6.2)500ml

Sorensen磷酸緩沖液(1×,pH6.2)500ml

Sorensen磷酸緩沖液(0.1mol/L,pH5.3-8.04)500ml

PBS-Triton去污劑(0.3%)100ml

幼蟲芽孢桿菌熒光定量PCR試劑盒探針法小鼠 FGFR1 / CD331 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)細(xì)胞甘油-3-脫氫(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20

小鼠 FETUB / Fetuin-B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)組織甘油-3-脫氫(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20

小鼠 EPHA4 / HEK8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)細(xì)胞甘油-3-脫氫-1Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-1)活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒  20

小鼠 EPHA4 / HEK8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)組織甘油-3-脫氫-1Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-1)活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒  20

小鼠 EPHA2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)細(xì)胞甘油-3-脫氫-2Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20

CES2 / Carboxylesterase-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)組織甘油-3-脫氫-2Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20

TREM1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)細(xì)胞甘油激(Glycerol kinase)活性連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒  20

TIM1 / KIM1 / HAVCR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)組織甘油激(Glycerol kinase)活性連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒  20

小鼠 IL12RB2 / IL12R-beta 2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)半乳糖基轉(zhuǎn)移(galactosyl transferase)  

小鼠 EpCAM / TROP1 / CD326 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)動(dòng)物多氧化(polyphenol oxidase;PPO)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20

SFTPD / SP-D 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)酵母多氧化(polyphenol oxidase;PPO)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20

 


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