當(dāng)前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>> 單孢子蟲通用PCR熒光定量檢測試劑盒
豬霍亂病毒即PCR熒光定量檢測試劑盒 分子生物學(xué)儀器
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 | 貨號 | BJ-P6827 |
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
單孢子蟲通用PCR熒光定量檢測試劑盒 | Haplosporidium spp.PCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6827 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。 2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。 3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。 4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
|
操作流程
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
100mL AMP Buffer,0.5M,pH9.0 AMP Buffer,0.5M,pH9.0 常溫保存溶血瓊脂基礎(chǔ)進口、國產(chǎn)用于鼠疫桿菌培養(yǎng)250
1瓶 IEC-6株 IEC-6 低溫運輸和保存濾膜糞大腸菌瓊脂進口、國產(chǎn)M-FC Agar250克大腸桿菌群的濾膜法檢測
2 ug pIRESshyg3 pIRESshyg3 低溫運輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Aminopeptidase Q
1瓶 SH3株 SH3 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Aminopeptidase O
100uL 潮抗性基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存A1 培養(yǎng)基進口、國產(chǎn)A1 Medium用于檢測水中的大腸菌群(US-EPA標(biāo)準(zhǔn))250
Preston肉湯基礎(chǔ) Preston Broth Base 250g 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Ceramide glucosyltransferase
1.5mL 甜菜堿溶液,5M,PCR級 Betaine Solution, PCR Grade 4℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Vasopressin-neurophysin 2-copeptin
2 ug pUSE (Amp) pUSE (Amp) 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Sarcosine dehydrogenase, mitochondrial
250g α- AMY (α-Amylase) 4℃保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Serologically defined colon cancer antigen 3
100mL MOPS Buffer,0.5M,pH7.4 MOPS Buffer,0.5M,pH7.4 常溫保存 31.2-2000 pg/mL 人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
100次 植物種屬鑒定PCR Mix 6(質(zhì)體 rbcL) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human 2'-5'-oligoadenylate synthase 3
單孢子蟲通用PCR熒光定量檢測試劑盒Annexin V-Alexa Fluor 647/PI Apoptosis Detection Kit 細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-Alexa Fluor 647/PI) 20 rxn
Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit 細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI) 20 rxn
TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC) TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(FITC) 20T
TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 488) TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(Alexa Fluor 488) 20T
TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 647) TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(Alexa Fluor 647) 20 rxn
Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit AnnexinV-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒 20T
Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric Caspase 3活性檢測試劑盒(比色法) 20T
Etoposide (100mM) 泊甙溶液(100mM) 100μl
General Caspase Inhibitor Z-VAD-FMK (20 mM 廣譜Caspase抑制劑(Z-VAD-FMK)(20mM) 25μl
CCCP(50mM) 細胞凋亡誘導(dǎo)劑 100μl
Clophosome-Clodronate Liposomes (Neutral) 體內(nèi)巨噬細胞清除劑(中性氯氟松) 2ml
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。