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我司供應(yīng)的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術(shù)指導(dǎo),免費代做實驗,索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產(chǎn)品名稱 | 豬腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Brain natriuretic peptide brain natriuretic peptide (BNP) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10843 |
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
人腦動脈血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL潮霉素B(羅氏原裝)Hygromycin B質(zhì)量規(guī)格:羅氏原裝,濃度50mg/ml
COS-6細胞,非洲綠猴腎細胞 A375(人類惡性色素瘤) 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1芹菜苷; 芹黃苷Apiin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
EFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)柯伊利素-7-O-葡萄糖苷,野決明苷Chrysoeriol 7-O-glucoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標準品
BC-021(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 綠色熒光蛋白標記小鼠子細胞;U14-GFP山柰酚-3-O-蕓香糖苷(標準品)Kaempferol-3-O-rutinoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人間充質(zhì)干細胞-肝臟總RNAHMSC-hp NA泮托拉唑鈉一水物Pantoprazole 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
腦動脈血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)wo7iumBORATEBUFFER硼酸鈉緩沖液超級白色精細結(jié)晶粉末RTsigma
AIM2 Others Human 人 AIM2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 3-肖基本安(易制暴) 3-nitnocnilinq 1999-9-
小鼠垂體瘤細胞(分泌促生長激素分泌激素);AtT-20谷草轉(zhuǎn)酶測試盒10個
293T/17[HEK 293T/17]細胞,人胚腎細胞 人膽管細胞型肝癌細胞,HCCC-9810細胞 CL-0160Molt-4(人急性母細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2wo7iumACETATE,2MSOLUTION,pH4.2醋酸鈉溶液生物技術(shù)級透明無色液體RTsigma
倉鼠卵巢細胞;Lec1922-67-8酸metxyl propiolate
T-109A彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL無水錄化銅shēng huà shì jì容量:100毫克
SK-N-SH, 人神經(jīng)母細胞瘤細胞 低轉(zhuǎn)移肺癌細胞,96-C細胞 PLC/PRF/5(肝癌亞力山大細胞) 2-Bromo-2-mqthylpropcnq 207-19-7
小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY堿式,英文名或英文縮寫:Lead(II)acetate basic,級別:CP,98.5%,規(guī)格:5克
PCSK9 Others Mouse 小鼠 PCSK9 / NARC1 人細胞裂解液 (陽性對照) 酸性氧化鋁shēng huà shì jì容量:100毫克
大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r55486-55-52,6-二甲氧基2,6-Dimetxoxy
豬腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)elisa進口試劑盒HMGB1 Others Human 人 HMGB1 / HMG1 人細胞裂解液 (陽性對照) 血紅素(>95%,BR)Hematin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1聚乙二醇800PEG 800質(zhì)量規(guī)格:BR
OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 炔雌;炔雌醇環(huán)戊Quinestrol質(zhì)量規(guī)格:USP
卵巢微血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1酸二酯酶 (比活度:>20 U/mg,BC)Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom質(zhì)量規(guī)格:比活度:>20 U/mg,BC
人臍靜脈平滑肌細胞 人胚肺細胞,NCI-H1563[H1563]細胞 MLTC-1(間質(zhì)細胞瘤細胞)化丙啶(>95% (HPLC),BC)Propidium iodide質(zhì)量規(guī)格:>95% (HPLC),BC
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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