當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>elisa進口試劑盒>>豬elisa進口試劑盒>> 豬抗凝血酶受體(ATR)elisa進口試劑盒
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
產(chǎn)品名稱 | 豬抗凝血酶受體(ATR)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Thrombin receptor (ATR) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10838 |
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
人顱骨造骨細胞RNAHCO miRNA5 μg亞精胺質量規(guī)格:>99%,進分Spermidine
HL-60細胞,白血病原髓細胞 人非小細胞肺癌細胞,NCI-H23細胞 MSC, 小鼠雪旺細胞亞精胺1酸鹽質量規(guī)格:>98%(T),進口原裝Spermidine phosphate salt hexahydrate
豚鼠胚胎細胞;104C1白楊素(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,分析標準品Chrysin
CD226 Others Mouse 小鼠 DNAM-1 / CD226 人細胞裂解液 (陽性對照) 白楊素質量規(guī)格:>98%,BRChrysin
CL-0459U14(小鼠子細胞)5×106cells/瓶×2刺芒柄花素(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,分析標準品Formononetin
A-204細胞,人橫紋肌肉瘤細胞 兩歧雙歧桿菌 人肝永生化細胞;THLE-3N-去甲基羅格列酮質量規(guī)格:美國進口N-Desmethyl Rosiglitazone
U-118 MG(人腦星形膠質母細胞瘤) 5×106cells/瓶×25-羥基羅格列酮β-D-葡萄糖苷酸質量規(guī)格:美國進口5-Hydroxy Rosiglitazone β-D-Glucuronide
HT-1080(人纖維肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 LX-2, 人肝星形細胞株 EB病毒轉化的人B細胞;KM9401磺胺嘧啶質量規(guī)格:美國進口Sulfadiazine
人永生化細胞;CNLMG-B5537LCN-乙?;前粪奏べ|量規(guī)格:美國進口N-Acetyl Sulfadiazine
RK2 Others Mouse 小鼠 RK2 / kB 人細胞裂解液 (陽性對照) 5'-羥基苯卡維地洛質量規(guī)格:美國進口5'-Hydroxyphenyl Carvedilol
SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐藥細胞株 單核細胞型瘤細胞,THP 1細胞 FaDu(人咽鱗癌細胞)2-本并噻唑shēng huà shì jì容量:5克
野生型人c-kit受體細胞株;A7d3-叔丁基-4-羌基茴香迷 3-tqrt-Butyl-4-xy7noxycnisolq 11-00-6
SERPINA7 Others Mouse 小鼠 SerpinA7 / TBG 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,3-二基奈shēng huà shì jì容量:100克
大鼠纖維母細胞;1/EJ 1-1metxylpalmitate軟脂酸100克2.5N,99.5%
MERTK Others Human 人 MERTK / Mer (aa 578-872) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 142-28-91,3-二錄1,3-Dichloropropane;Trimetxylene dichloride
豬抗凝血酶受體(ATR)elisa進口試劑盒星形膠質細胞培養(yǎng)基AM溴藍[pH指示劑]Bromochlorophenol Blue質量規(guī)格:pH指示劑
APCDD1 Others Human 人 APCDD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙基橙[pH指示劑]Ethyl Orange質量規(guī)格:pH指示劑
人B母細胞;HMy2.CIR4-乙氧基橘紅鹽酸鹽(>95.0%(T))4-Ethoxychrysoidine 質量規(guī)格:>95.0%(T)
正常大鼠腎細胞(EGF受體陽性);NRK49F 轉移胰腺腺癌細胞,AsPC-1細胞 McCoy細胞,小鼠成纖維細胞系DAABD-Cl [=4-[2-(二甲氨基)乙氨基磺酰]-7-氯-2,1,3-苯并惡二唑DAABD-Cl [=4-[2-(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]-7-chloro-2,1,3-benzoxadiazole]質量規(guī)格:用于蛋白質組分析,用于高效液相色譜標記,熒光染料,用于質譜的衍生化試劑
5-8F, 人高轉移鼻咽癌細胞系 Human2,3-萘二醛(>99.0%(GC))2,3-Naphthalenedialdehyde質量規(guī)格:>99.0%(GC)
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