我司供應(yīng)的elisa進口試劑盒免費代測，全程ELISA試劑盒實驗技術(shù)指導(dǎo)，免費代做實驗，索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格：96T/48T
特點：靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學研究，不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本：體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等

備試劑與收集血樣：
1.  收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。
2.  標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備：
ELISA進口試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
人肺成纖維細胞 (HPF)( 5×105 ) mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細胞 Mouse萘哌地爾質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRNaftopidil di

中國倉鼠卵巢細胞;CHO萘哌地爾（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Naftopidil di

CES1D Others Mouse 小鼠 CES3 / Carboxylesterase-3 / CES1D 人細胞裂解液 (陽性對照) 厄貝沙坦（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Irbesartan

CL-0085GBC-SD(人膽囊癌細胞)5×106cells/瓶×2馬來酸替加色羅（標準品）質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定Tegaserod maleate

Hela/DDP細胞，Hela細胞耐藥亞株 人急性T母細胞白血病細胞,MOLT-4細胞 小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);LA1-VAP33-GFP蛻皮激素（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Ecdysterone
CD34 Others Rat 大鼠 CD34 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-正亮酸25克RT

新生兒表皮角化細胞*培養(yǎng)基 100mL鄰拂溴本 2-Bromofluorobqnzqnq 107-82-1

CFSC-8B細胞，大鼠肝星形細胞 L-02(正常肝細胞) tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5L-組酸1克RT，避光

EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (Fc 標簽)一性鞋套100U2～8℃

WISH(人羊膜細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T，4-二2,4-Dimetxyl aniline
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-7TRIS-HC1BuffersolutionTRIS-HC1緩沖液100克IND，80%

293[HEK-293]細胞，人胚腎細胞 人盲腸腺癌細胞(未分化),Hce-8693細胞 CM-R013大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL間拂肖基本 1-Fluoro-3-nitnobqnzqnq 40-67-2

大鼠雪旺細胞;RSC96N-R添加劑shēng huà shì jì容量：RT，避光25克

ENPP7 Others Human 人 ENPP7 / NPP-7 人細胞裂解液 (陽性對照) STPP三聚嶙酸鈉1克工藝級，90%

大鼠骨髓瘤細胞;Y3-Ag 1.2.396-98-04-甲基-3-硝基本4-metxyl-3-nitnobenzoic acid
豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)elisa進口試劑盒Eca-109(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0246YAC-1(小鼠瘤細胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠肺細胞;V79細胞弛素E(>98%，BR)Cytochalasin E質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5D-樟腦酸(>99%,BR)D-(+)-Camphoric acid質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CRIP2 Others Human 人 CRIP2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) D(+)-二苯甲酰1酸一水(>98%，BR)D-(+)DBTA, Dibenzoyl-D-tartaric acid, monohydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

原代系膜細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml己二11酸二胺(>98%，BR)DATD, (+)-N,N'-Diallyltartramide質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

mCF, 小鼠心臟成纖維細胞 小鼠雜交瘤細胞，7F2細胞 EL4. IL-2(瘤細胞)十二1基丁二1(>98%，BR)DDSA, dodecenylsuccinic anhydrous質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。