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備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
產(chǎn)品名稱 | 豬低分子肝素(LMWH)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Porcine low molecular weight heparin (LMWH) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10828 |
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
人結腸平滑肌細胞cDNAHCSMC cDNA無水碳酸鈉質量規(guī)格:AR,≥99.8% carbonate anhydrous
NCL-H460細胞,非小細胞肺癌 人肺動脈內皮細胞,HPAEC細胞 肝動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-果糖質量規(guī)格:>99%,BRD-Fructose
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)核黃素1酸鈉水合物質量規(guī)格:核黃素73.0 ~79.0%Riboflavin 5'-monophosphate salt hydrate
TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人細胞裂解液 (陽性對照) 溴化乙錠溶液,10 mg/ml質量規(guī)格:>98%,BREB, Ethidium bromide stock solution, 10 mg/ml
CL-0231TE-1(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×2APMSF(進分)質量規(guī)格:進分,sigma A6664p-APMSF,
Raji人Butt's瘤細胞 Raji human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS葡聚糖T7shēng huà shì jì容量:50毫克
FGF12 Protein Canine 重組狗 FGF12 蛋白4-肖基-L-本炳安醋 4-nitno-3-phqnyl-L-clcninq 949-99-2
AML-193(人急性單核細胞白血病單核細胞) 5×106cells/瓶×2 人神經(jīng)細胞HN尿酸酶shēng huà shì jì容量:25克
人腎小球內皮細胞cDNAHRGEC cDNACOOMASSIEBRILLIANTBLUEG-250考馬斯亮蘭G-250超級藍色至紅色結晶粉末RTsigma
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 12027-06-4化銨;化铔AMMoniuM iodide
Promocell C-28021 Hematopoietic Progenitor CellExpansion Medium DXF, 造血祖細胞擴展培養(yǎng)基DXF 500mlCDC厭氧菌瓊脂100克
大鼠腎系膜細胞;RMC1-基硼醋 1-Ncphthylboronic ccid 139-41-3
SMAD5 Others Mouse 小鼠 Smad5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎100毫升
肺成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Gadolinium(III)oxide三氧化二釓5克CP,97%
人腦微血管內皮細胞 人肺癌細胞,NCI-H520[H520]細胞 SAC-IIB2(腹水瘤細胞)二乙基己1雌酚二酸鹽NA
豬低分子肝素(LMWH)elisa進口試劑盒人胚胎肺成纖維細胞;WI-38三醋酸甘油酯(>98%,BR)Glycerol triacetate質量規(guī)格:>98%,BR
PIEC細胞,豬髖動脈內皮細胞 人結腸癌細胞,T84細胞 CM-H061人腎小球內皮細胞*培養(yǎng)基100mL甘氨酸鈉(>98%,BR)Glycine salt質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1乙醇酸(>98%,BR)Glycolic acid質量規(guī)格:>98%,BR
RK1 Others Human 人 kA / RK1 人細胞裂解液 (陽性對照) 硬脂酸單甘油酯(>98%,BR)GMS, glycerol monostearate質量規(guī)格:>98%,BR
心肌細胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)氯化金Gold (III) chloride tetrahydrate質量規(guī)格:BC
我司供應的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術指導,免費代做實驗,索取產(chǎn)品說明書。
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