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我司供應(yīng)的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術(shù)指導,免費代做實驗,索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產(chǎn)品名稱 | 豬潑尼松龍(Prednisolone)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Ip Nixonn Ron (Prednisolone) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10846 |
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
人腦血管平滑肌細胞總RNAHBVSMC tDNA牛血紅蛋白質(zhì)量規(guī)格:BRHemoglobin
山羊皮膚成纖維樣細胞;DG-S1 胚腎細胞,AAV-293細胞 HP615細胞,615小鼠肺癌瘤株聚乙二醇10000質(zhì)量規(guī)格:分子量9,000~11,000PEG 10000
人干細胞因子單克隆抗體細胞株;AMS2(SCF3)DL-蘋果酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDL-Malic acid
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Common magpie/Hong Kong/2256/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) D-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD-Tyrosine
CL-0301M-NFS-60 (小鼠白血病細胞G-CSF依賴性)5×106cells/瓶×2D-組氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD-Histidine
615小鼠網(wǎng)織細胞性白血病瘤株;L615 小鼠腎足突細胞*培養(yǎng)基 100mL10-脫乙酰巴卡亭質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR10-Deacetylbaccatin III
人絨毛膜內(nèi)皮細胞 Human維生素B1(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品vitamin B1
EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細胞裂解液 (陽性對照) 維生素B1質(zhì)量規(guī)格:>99%,USPVitamin B1
人無色素睫狀上皮細胞HNPCEpiC維生素B12(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品vitamin B12
NOV Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)10-十一炔-1-醇(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)10-Undecyn-1-ol
人尿道上皮細胞(HUC)(5×105) 人羊膜上皮細胞 Human堅牢紅鹽,英文名或英文縮寫:Fast red GG salt,級別:高,65%,蘋果來源,規(guī)格:1克
大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F(S)-(-)-叔丁基亞磺酰安 (S)-(-)-2-Mqthyl-2-propcnqsulfincmidq 343338-8-3
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) L-酪安醋;;;L-β-隊羌本基-α-安基炳醋;L-干酪安基醋 L-Tyrosinq;(S)-2-cMino-3-(4-xy7noxyphqnyl)propionic ccid;3-(4-xy7noxyphqnyl)-L-clcninq;L-α-cMino-β-p-xy7noxyphqnylpropionic ccid;L-α-cMino- p-xy7noxyxy7nocinncMic ccid 60-18-4
T-107A中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mLGENEPAGEPLUS5.25%6MUREA*CLDPAK5.25% GENE PAGE PLUS, 6M 尿素生物技術(shù)級500MLCOLD
HEp-2細胞,人喉表皮樣癌細胞 人臍靜脈內(nèi)皮細胞,HUVE-12/CRL2480細胞 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-2162778-12-5N,N-二甲基對本草酸鹽N,N-Dimetxyl-1,4-pxenylenediamine oxalate
豬潑尼松龍(Prednisolone)elisa進口試劑盒人成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL煙酸乙酯(>98%,BR)Ethyl nicotinate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
HS-4細胞,人皮膚癌細胞系 鼠傷寒沙門氏菌Ta97 雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12二茂鐵Ferrocene質(zhì)量規(guī)格:>98%
XCL1 Protein Canine 重組狗 XCL1 蛋白 (His 標簽)反苯環(huán)丙胺鹽酸鹽;單胺氧化酶(MAO)抑制劑Tranylcypromine (2-PCPA) HCl質(zhì)量規(guī)格:>97%,單胺氧化酶(MAO)抑制劑
ME-180(人子宮頸表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL1RL1 / ST2 人細胞裂解液 (陽性對照) 黃胺酸(>96.5%,BS)Flavianic acid hydrate質(zhì)量規(guī)格:>96.5%,BS
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21酸性品紅鈣(>60%,BS)Fuchsin acid calcium salt質(zhì)量規(guī)格:>60%,BS
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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