一、樣品 DNA 的制備

用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。

二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（最好用帶芯槍頭，下同）。

3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。

4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。

5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。

6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。

7. NC 管中不加任何陽性對照。

8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱：綠膿假單胞菌熒光定量PCR試劑盒探針法

英文名稱：Pseudomonas aeruginosa

貨號:BJ-P9978

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

運(yùn)輸：低溫

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

實(shí)驗(yàn)外包:

基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

特點(diǎn)優(yōu)勢：

1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。

5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

C反應(yīng)蛋白測定試劑盒(膠乳增強(qiáng)免疫比濁法)C -reactive protein Assay KitR1：40ml×1 R2：10ml×1

脂蛋白α測定試劑盒(膠乳增強(qiáng)免疫比濁法)Lipoprotein α Assay KitR1：40ml×1 R2：10ml×1

載脂蛋白A-I測定試劑盒(免疫比濁法)Apolipoprotein A-I Assay KitR1：45ml×2 R2：30ml×1

β2微球蛋白測定試劑盒(膠乳增強(qiáng)免疫比濁法)β2 microglobulin Assay KitR1：40ml×1 R2：10ml×1

載脂蛋白B測定試劑盒(免疫比濁法)Apolipoprotein B Assay KitR1：45ml×2 R2：30ml×1

前白蛋白測定試劑盒(免疫濁度法)Prealbumin Assay KitR1:45ml×1；R2:15ml×1

鋅測定試劑盒(絡(luò)合比色法)Zinc Assay KitR1：40ml×1 R2：10ml×1

銅測定試劑盒(絡(luò)合比色法)Copper Assay KitR：10ml×5

總膽汁酸測定試劑盒(酶比色法)Total Bile acid Assay KitR1：40ml×2 R2：10ml×2

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶測定試劑盒(連續(xù)監(jiān)測法)Angiotensin-converting enzyme Assay KitR1：50ml×3

綠膿假單胞菌熒光定量PCR試劑盒探針法人 ICAM-1 / CD54 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)動(dòng)物組織氫ATP（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 TNFRSF14 / HVEA / HVEM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)細(xì)氫ATP（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 HMGB1 / HMG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)酵母氫ATP（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 HGFA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)植物氫ATP（H＋－ATPase）總活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 IgG1-Fc 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)植物P型氫ATP（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 HAPLN1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)植物V型氫ATP（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 Granzyme H 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)植物F型氫ATP（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

人 Granzyme B / GZMB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)動(dòng)物細(xì)胞銅ATP（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測試劑盒  20次

人 GM-CSFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)動(dòng)物組織銅ATP（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測試劑盒  20次

人 CD114 / G-CSFR / GCSFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)細(xì)銅ATP（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測試劑盒  20次

人 CD114 / G-CSFR / GCSFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)酵母銅ATP（Cu＋＋ －ATPase）活性比色法量檢測試劑盒  20次