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貨號(hào)	BJ-X97395

培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號(hào)
大鼠角膜成纖維細(xì)胞	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶	BJ-X97395

商品介紹：

名稱 大鼠角膜成纖維細(xì)胞

2.組織來源：眼角膜組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠角膜成纖維細(xì)胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的角膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁*，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。角膜成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持角膜的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

5.方法簡介：

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜成纖維細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號(hào)CM-R123

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

人混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)封閉因子(MLR-Bf)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

馬COR)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠胸腺表達(dá)趨化因子25(TECK/CCL25)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠甘免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

魚熱休克蛋白90(HSP-90)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

改良愛德華瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱：Edwards Medium,Modified 產(chǎn)品規(guī)格：250g

HB四連式牛津杯英文名稱：產(chǎn)品規(guī)格：10個(gè)*15包/箱

豬胰島素(INS)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

小鼠腺病毒IgG抗體免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

小鼠高靈敏度促?

大鼠角膜成纖維細(xì)胞Herba ephedrae麻黃探針法PCR鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-4周HSP22 熱休克蛋白-22抗體規(guī)格: 0.1mlMYL7 肌球蛋白輕鏈7抗體規(guī)格: 0.2ml

Herpes Simplex Virus(HSV)單純皰疹病毒2型LAMP試劑盒動(dòng)物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周MAP7D1/RPRC1 /脯富含卷曲蛋白1抗體規(guī)格: 0.2mlFBXO33 F-box蛋白相關(guān)蛋白33抗體規(guī)格: 0.2ml

Eurytrema pancreaticum胰闊圓盤吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒動(dòng)物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周Runx3 Runx3抗體規(guī)格: 0.1mlARHGAP32 Rho GTP激活蛋白32抗體規(guī)格: 0.2ml

Caulis perillae紫蘇梗LAMP鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-4周MEF2C 肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C抗體規(guī)格: 0.1mlRGC32 補(bǔ)體應(yīng)答基因32抗體規(guī)格: 0.2ml

榛子源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周c-Maf 原基因cMAF抗體規(guī)格: 0.1mlCaspase 14 半胱胺酸蛋白蛋白14抗體規(guī)格: 0.2ml

Canine Norovirus 犬諾瓦克病毒探針法熒光定量PCR試劑盒動(dòng)物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周BK channel BK通道蛋白抗體規(guī)格: 0.1mlSarcomeric Alpha Actinin/ACTN2 α橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白/α-SCA抗體 0.1ml

Phialophora malorum蘋果邊腐病PCR試劑盒植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周ZCWCC1 ZCWCC1抗體規(guī)格: 0.1mlCaspase 8 半胱蛋白8抗體規(guī)格: 0.1ml

Cortex phellodendri黃柏PCR鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-4周HCF2/Heparin Cofactor II 肝素輔助因子II抗體規(guī)格: 0.2mlphospho-ATG4D(Ser15) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體規(guī)格: 0.1ml

Plasmodium knowlesi諾氏瘧原蟲LAMP試劑盒動(dòng)物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周CD75 唾液酸轉(zhuǎn)移1/α-2,6唾液酸轉(zhuǎn)移抗體規(guī)格: 0.2mlGalectin 3 半糖凝集素3抗體規(guī)格: 0.1ml

Ostertagia podjapolskyi波氏奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒動(dòng)物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周Titin/CMD1G 擴(kuò)張型心肌蛋白1G抗體規(guī)格: 0.2mlCSFV/Classical swine fever virus 豬瘟毒抗體 0.2ml