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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
初級會(huì)員 | 第8年

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丹毒絲菌屬通用熒光定量PCR試劑盒探針法

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-07-11 16:35:54瀏覽次數(shù):122次

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產(chǎn)地 國產(chǎn) 加工定制
適用領(lǐng)域 科研 貨號 BJ-P9563
丹毒絲菌屬通用熒光定量PCR試劑盒探針法公司正在出售的產(chǎn)品:1套 玻璃勻漿器,1 mL Glass Homogenizer 常溫保存20次 多點(diǎn)突變試劑盒 Multipoints Mutagenesis Kit -20℃保存100mL MOPS Buffer,0.5M,pH7.0 MOPS Buffer,0.5M,pH7.0 常溫保存100次 枯草桿菌 PCR Mix 4(SSU) Bac

實(shí)驗(yàn)過程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

貨號

丹毒絲菌屬通用熒光定量PCR試劑盒探針法

Erysipelothrix spp

多種規(guī)格

BJ-P9563

QQ截圖20191204143322.jpg

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

特點(diǎn)優(yōu)勢:

1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。

2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。

4.   實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。

5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

1.jpg



 

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物110pM              2μl

引物210PM             2μl

Taq酶(2U/μl           1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

ddH2O              50 μl

PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

三、注意事項(xiàng)

1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。

2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。

3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。

 

 

操作流程

1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。

4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。

6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。

9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

c-Myc抑制劑(10058-F4)10058-F41mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

VEGFR2抑制劑(Vandetanib)Vandetanib1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg|500mg

酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶抑制劑(nMPRTase抑制劑)(FK866)FK8661mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

CSF-1R抑制劑(BLZ945)BLZ9451mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

hedgehog抑制劑(Vismodegib)Vismodegib1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

ERK激酶抑制劑(GDC-0994)GDC-09941mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

AKT激酶抑制劑(AZD5363)AZD53631mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

mTOR激活劑(自噬抑制劑)MHY14851mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

p53-MDM2相互作用抑制劑(AMG 232)AMG 2322mg|5mg|10mg|50mg|100mg

Smad3抑制劑(SIS3)SIS31mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg

丹毒絲菌屬通用熒光定量PCR試劑盒探針法大鼠 NTRK2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽盤基網(wǎng)柄(Dicyostelium)細(xì)胞趨化作用(chemotaxis)  10

大鼠 NTRK2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), FLAG標(biāo)簽軟瓊脂檢測試劑盒  

小鼠 VDR 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽細(xì)細(xì)胞趨化作用(chemotaxis)軟瓊脂檢測試劑盒  10

小鼠 IL17A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽通用型細(xì)胞粘附性(cell adhesion)比色法檢測試劑盒  50

小鼠 IL17A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), FLAG標(biāo)簽通用型細(xì)胞粘附性(cell adhesion)熒光檢測試劑盒  50

小鼠 IL2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽通用型血液凝集分子纖維蛋白檢測法(Fibrometer)分析試劑盒  50

小鼠 IL2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), FLAG標(biāo)簽肝素(heperin)纖維蛋白檢測法(Fibrometer)分析試劑盒  50

小鼠 LIGHT / TNFSF14 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽肝素(heperin)活性比色法定量檢測試劑盒  20

小鼠 LIGHT / TNFSF14 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), FLAG標(biāo)簽肝素(heperin)活性比色法定量檢測試劑盒  20

小鼠 CCR2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽水蛭素(hirudin)纖維蛋白檢測法(Fibrometer)分析試劑盒  50

小鼠 CCR2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), FLAG標(biāo)簽水蛭素(hirudin)活性比色法定量檢測試劑盒  20


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