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人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)elisa進口試劑盒
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
產(chǎn)品名稱 | 人腎損傷分子1(Kim-1)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Human kidney injury molecule 1 (Kim-1) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10716 |
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1山柰酚-3-O-蕓香糖苷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Kaempferol-3-O-rutinoside
IL2RB Others Human 人 IL2Rβ 人細胞裂解液 (陽性對照) 泮托拉唑鈉一水物質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPantoprazole
CM-H027人成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL超細高嶺土(6000(3.5um))質(zhì)量規(guī)格:6000(3.5um)Kaolin(superfine)
HA Others H4N8 甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 高嶺土(醫(yī)藥級)質(zhì)量規(guī)格:醫(yī)藥級Kaolin
胰蛋白酶(含100mL 酶解緩沖液) 10mL硅藻土G(TLC)質(zhì)量規(guī)格:TLCKieselguhr G
BACE1 Others Mouse 小鼠 BACE-1 人細胞裂解液 (陽性對照) (R)-7-乙基喜樹堿質(zhì)量規(guī)格:美國進口(R)-7-Ethyl Camptothecin
人整合SV40基因的上皮細胞;HBL-100 [HBL100]7-乙基-喜樹堿-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口7-Ethyl-d3-camptothecin
DNASE1 Others Human 人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 卡培他濱-d11質(zhì)量規(guī)格:美國進口Capecitabine-d11
CL-0384MDA-MB-468-06(人癌細胞)5×106cells/瓶×2卡培他濱-2',3'-環(huán)狀碳酸酯質(zhì)量規(guī)格:美國進口Capecitabine-2',3'-cyclic Carbonate
Mv1Lu細胞,貂肺上皮細胞 人紅白細胞白血病細胞,HEL細胞 人皮膚成纖維細胞;HSAS49,9-雙(4-氨苯基)芴(升華提)(>99.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(T)9,9-Bis(4-aminophenyl)fluorene (purified by sublimation)
CD5L Others Human 人 CD5L / API6 人細胞裂解液 (陽性對照) Hanks平衡鹽1盒
表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB1霉素鈉 Phosphomycin di salt 26016-99-9 25G 通用試劑
大鼠神經(jīng)質(zhì)細胞(RNsn)(1×106)羌基酚蘭二內(nèi)鹽 xy7noXY NcPHTHOL BLUq 162660-7-2
CM-H032人食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mLRPR(梅毒)25片/盒
正常小鼠Sertoli細胞;TM4 小鼠子宮平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL67627-18-3靛藍三磺酸鉀potewwium INDIGOTRISULFONATE
人腎損傷分子1(Kim-1)elisa進口試劑盒原代軟骨細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml?;蝗?/span>-β-D-葡萄糖苷酸Furosemide Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
MSC, 小鼠雪旺細胞 小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞,PT67細胞 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1](骨髓瘤細胞)ent-加蘭他敏ent-Galanthamine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人巨細胞白血病細胞株;Mo7e差向-加蘭他敏N氧化物Epi-galanthamine N-Oxide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CD200R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200R / OX2-R 人細胞裂解液 (陽性對照) 加蘭他敏N氧化物Galanthamine N-Oxide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
小鼠海馬趾神經(jīng)元MN-h加蘭他敏β-D-葡萄糖苷酸Galanthamine β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
我司供應的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術指導,免費代做實驗,索取產(chǎn)品說明書。
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