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貨號 | BJ-X97111 |
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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X97111 |
商品介紹:
名稱 小鼠食管上皮細胞 2.組織來源:食管組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 小鼠食管上皮細胞分離自食管組織;食管是咽和胃之間的消化管,食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,隨著頸部的伸長和心肺的下降,而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中,食管的上皮細胞增殖,由單層變?yōu)閺蛯?,食管使管腔變狹窄,甚至一度閉鎖,以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動物的食管結構上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,黏膜層,包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復層扁平上皮,耐摩擦,有保護作用。在食管與胃賁門交界處,復層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復層扁平上皮細胞覆蓋,其頂端細胞膜和細胞間連接復合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障,防止食管內(nèi)容物的滲入。特別的是,層屏障使表層細胞的基質外側細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學上講,食管上皮由兩層組成,基底層和分化層;其中,僅基底層的細胞可以增殖,然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標記的依序表達。食管上皮細胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。 5.方法簡介: ()實驗室分離的小鼠食管上皮細胞采用機械分離法結合組織貼塊法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: ()實驗室分離的小鼠食管上皮細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M027 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
人鞘脂激活蛋白原(PSAP)免疫試劑盒進口、分裝
人抗磷脂酰乙醇胺抗體(IgG)免疫試劑盒進口、分裝
人鈣結合蛋白(CR)免疫試劑盒進口、分裝
人β乳糖蛋白抗體IgG 免疫試劑盒*直銷
犬K1(VK1)免疫試劑盒進口、組裝
綿羊白介素1β(IL-1β)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
大鼠脂蛋白α(Lp-α)免疫試劑盒*直銷
大鼠流行性出血熱IgG抗體免疫試劑盒*直銷
大鼠白三烯E4(LTE4)免疫試劑盒進口、分裝
魚胞漿型磷脂A2A(cPLA2A)免疫試劑盒*直銷
小鼠食管上皮細胞Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒C型LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周PSF2 PSF2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlFrizzled 5 Wnt信號受體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Human Papillomavirus 14(HPV-14)人瘤病毒14 探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ALOX15B/15 Lipoxygenase 2 花生四烯酸15脂氧合2抗體 規(guī)格: 0.2mlCKAP5/ch TOG 結腸和肝瘤高表達蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rhizoma cyperi香附探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周phospho-Dnmt1(Ser732) 磷酸化DNA甲基轉移1抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml
Piscirickettsia salmonis鮭魚立克次氏體LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周FLT3L FMS樣酪激3配體抗體 規(guī)格: 0.2mlTANC1 TANC1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Nematodirus spathiger匙狀*毛樣線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周AF10/MLLT10 髓系、淋巴、混合系白易位基因10抗體 規(guī)格: 0.1mlSRRM1 絲/相關核基質蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Akabane Disease Virus(AKAV)牛赤羽病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-human IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.3mlIL-6 白介素6 規(guī)格: 0.1ml
河豚魚源性成分PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周p70 S6 kinase beta 核糖體蛋白S6激1抗體 規(guī)格: 0.2mlLDHA/LDH 酸脫抗體 規(guī)格: 0.1ml
狗源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ZNF471 鋅指蛋白471抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-ERK5( Ser731+Thr733) 磷酸化細胞外信號調節(jié)激5抗體 規(guī)格: 0.1ml
Didymella ligulicola菊花花枯病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周PAI-2/SerpinB2 纖溶原激活物抑制因子2抗體(漿原激活抑制因子-2) 規(guī)格: 0.1mlTIE1 管生成素受體1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Influenza Virus A N3(AIV-N3)甲型流感()病毒N3亞型RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Phospho-HER3 (Tyr1289) 磷酸化HER3受體抗體 規(guī)格: 0.1mlHAND2 心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
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