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人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)elisa進口試劑盒
我司供應的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術指導,免費代做實驗,索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產(chǎn)品名稱 | 人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Human glucocorticoid receptor beta (GR- beta) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10763 |
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
家貓腎細胞;CATK1BAEE;N-苯甲?;?/span>-L-精氨酸乙酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBAEE
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) ATEE;N-乙酰-L-酪氨酸乙酯質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRN-Acetyl-L-tyrosine ethyl ester monohydrate
CL-0378MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14)5×106cells/瓶×2β-D-葡糖糖-6-1酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:98%,美國進口D-Glucose 6-phosphate salt
EFNA5 Others Rat 大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 人細胞裂解液 (陽性對照) NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(美侖)質(zhì)量規(guī)格:>97%,國產(chǎn)美侖Coenzyme II reduced tetra salt(NADPH)
小鼠肺成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL葡萄糖氧化酶質(zhì)量規(guī)格:BR,>200U/mgGlucose oxidase
Promocell C-25110 Hepatocyte Growth MediumKIT, 肝細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)9,9'-Spirobi[9H-fluorene]
人心肌細胞-心房總RNAHCF-aa NA2-氨基蒽(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)2-Aminoanthracene
CD38 Others Cynomolgus 食蟹猴 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-氨基蒽(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)1-Aminoanthracene
人大隱靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL9-溴蒽(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)9-Bromoanthracene
Ana-1細胞,小鼠巨噬細胞 WEHI 22.1(B細胞) 小鼠B細胞雜交瘤細胞;SH22'-脫氧鳥苷-13C,15N2質(zhì)量規(guī)格:美國進口2'-Deoxyguanosine-13C,15N2
人組織細胞瘤細胞;U937 [U-937]二正辛胺shēng huà shì jì容量:1公斤
CLEC7A Others Mouse 小鼠 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細胞裂解液 (陽性對照) N-本基-1,4-本二安 4-cminodiphqnylcminq 101-24-
大耳山羊皮膚細胞;LDG-3丁酰膽堿酯酶測試盒shēng huà shì jì容量:RT1000支/盒
11. 前列腺細胞系統(tǒng)酵母蛋白胨培養(yǎng)基支RT
CL-0139Li-7(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2Uridine 5g/10g/50g原裝 Amresco 0975
人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)elisa進口試劑盒CXCL16 Others Canine 狗 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照) 酸漿苦味素L(標準品)Physalin L質(zhì)量規(guī)格:供鑒別用
CM-R114大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL1-甲基海因(標準品)1-METHYLHYDANTOIN質(zhì)量規(guī)格:供鑒別用
KYSE70細胞,人食管鱗癌 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞,SHG-44細胞 豬腎傳代細胞;IBRS-2古倫賓(標準品)Columbin質(zhì)量規(guī)格:供含量測定用
CFPAC-1(人胰腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2安五脂素(標準品)Anwuligan質(zhì)量規(guī)格:鑒別
TNFSF8 Others Human 人 CD30 Ligand / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) 絡石苷(標準品)tracheloside質(zhì)量規(guī)格:含量測定
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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