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中性粒細胞堿性磷酸酶染色液價格

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更新時間:2022-09-09 10:30:01瀏覽次數(shù):181次

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貨號 BJ-01R3648
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XPC DNA補充修復XPC細胞蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlDonkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlTuberin/TSC2 馬鈴薯球蛋白(結節(jié)性硬化)抗體 規(guī)格: 0.2mlUSP9X 泛素特異性蛋白9X抗體 規(guī)格: 0.2mlAUP1/Ancient ubiq

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1)     轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

公司產品具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產品名稱:中性粒細胞堿性磷酸酶染色液價格

貨號:BJ-01R3648

規(guī)格:3×10ml

分類:酶類染色

儲存條件:4℃,避光,6個月

用途:NAP染色液,專門用于血液或骨髓細胞涂片的中性粒細胞的堿性磷酸酶染色,又稱同時偶聯(lián)法(Waplow法)。

注意事項:堿性磷酸酶活性部位呈藍色,位于胞槳中。油鏡下計數(shù)101個中性粒細胞,求出百分比和積分。非特異性反應少,結果可靠。

注意事項:

1、盡注意無菌操作,避免污染。

2、避免反復凍融。

3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

標準溶液的配制:

1.直接配制法    對于純凈的物質(稱做基準物質)可準確進行稱量,用蒸餾水溶解后,轉移到一定容積的容量瓶中稀釋至標線,溶液的準確濃度可以直接計算出來。溶質的純度、性質等對濃度有較大影響,為此,對用來直接配制標準溶液用的基準物質必須具備以下條件:

(1)物質的純度要高,含量不得低于99.9%,雜質的含量應當少到可以忽略的程度。

(2)物質的分子組成應與其化學式*符合,包括結水合物中的結品水含量也必須與其化學式相符合。如硼砂Na2B4O7·10H2O等。

(3)性質穩(wěn)定,貯蔵時應不發(fā)生變化,不易吸收空氣中的水分、二氧化碳等氣體而改變其成分,不易風化潮解和被空氣氧化,烘干時不易分解等。此外最好使用分子量較大的基準物質以減小稱量誤差。

2.間接配制法    凡不符合基準物質條件的物質,可先配制成近似所需濃度的溶液,再用基準物質溶液或能與其發(fā)生定量反應的標準溶液進行滴定,求其準確濃度,這種通過滴定來確定準確濃度的操作叫做“標定"。間接法配制近似濃度溶液時不需用分析天平稱量和容量瓶配制,可用臺秤、量筒等器皿。將稱好的物質轉移到干凈的試劑瓶中,先加少量蒸餾水將其溶解,繼續(xù)用量筒加蒸餾水至需要量即可。由于大多數(shù)試劑不符合基準物的條件,故間接法配制標準溶液是經常的。如固體NaOH因易吸收空氣中的水分而潮解和吸收CO2使表面變質;濃鹽酸因易揮發(fā)而無法準確稱量;不易得到分析純級的試劑等,這些物質的標準溶液須用間接法來配制,經標定后再做標準溶液使用。

2.png 

標準溶液的標定:

1.用基準物質標定法

(1)多次稱量法    用減重法精密稱取幾份(如2~3份)基準物質,分別倒入編號的干凈錐形瓶(或燒杯)內,各加少量蒸餾水溶解,再加指示劑后分別用待標定溶液滴定至等當點,各自記錄所消耗待標定溶液的體積,結合基準物質的重量分別算出溶液的準確濃度,最后取平均值做為標準溶液的濃度。

(2)移液管法    精密稱取一份基準物質,在干凈的小燒杯內加少量蒸餾水溶解,順玻棒全部轉移到已校正好的容量瓶中,多次沖洗燒杯洗液并入容量瓶中,最后配成一定體積的溶液,混勻。每次滴定用配套的移液管吸取并轉移至錐形瓶中,加指示劑后用待標定溶液滴定至等當點,每次做好記錄,根據所消耗待標定溶液的體積,結合基準物質的重量,分別算出溶液的準確濃度取平均值做為標準溶液的濃度。

2.比較法標定    如果待標定溶液能與某標準溶液進行反應,可吸量一定體積的某標準溶液,用待標定溶液滴定,或吸量一定體積的待標定溶液,用某標準溶液滴定。根據兩溶液所消耗的毫升數(shù)及某標準溶液的濃度,按N1V1=N2V2式可以計算出待標定溶液的準確濃度。這種用標準落液來測定待標定溶液準確濃度的過程稱為“比較法"標定。如果某標準溶液的濃度由于某些原因不夠準確時,就會直接影響待標定溶液濃度的準確性,顯然比較法不如用基準物質直接標定的方法精確,但比較法簡便易行。

標定完畢,蓋緊標準溶液試劑瓶塞,瓶簽上注明標準溶液名稱、準確濃度和日期等。

鮭魚源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周P21/CDKN1A  p21蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlChondroitin Sulfate  抗體 規(guī)格: 0.2ml

Haemophilus spp.嗜血桿通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周SMMHC/Myosin  平滑肌肌球蛋白重鏈抗體 規(guī)格: 0.1mlGLT8D2  糖基轉移GLT8D2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Tilletia indica小麥鳊腥黑穗病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周WNT2  信號通路Wnt2抗體 規(guī)格: 0.2mlMYF5  生肌決定因子Myf5抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rhizoma menispermi北豆根PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-4周phospho-Ephrin B(Tyr316)  磷酸化Ephrin B抗體 規(guī)格: 0.1mlET-1  內皮素-1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Leptospira spp.鉤端螺旋體通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周SOX22  核轉錄因子SOX22抗體 規(guī)格: 0.2mlCCR-2B  細胞表面趨化因子受體2B抗體 規(guī)格: 0.1ml

Gymnosporangium fuscum歐洲梨銹病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的羊抗雞IgG 規(guī)格: 0.1mlTRPM7  瞬時受體電位離子通道蛋白7抗體(M亞家族) 規(guī)格: 0.2ml

Fructus kochiae地膚子探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-4周CTAGE6  CTAGE6蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlNDRG4  抑基因NDRG4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Bunostomum trigonocephalum羊仰口線蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周Connexin-40  間隙連接蛋白40抗體 規(guī)格: 0.1ml5 MethylCytosine  5甲基胞嘧啶抗體 規(guī)格: 0.2ml

Boheliridovirus(BIV)飾紋汀蛙虹彩病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周Rabbit Anti-MK IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗猴IgM 規(guī)格: 0.1mlANKS1A  錨蛋白重復及SAM結構域蛋白1A抗體 規(guī)格: 0.2ml

Cortex cinnamomi肉桂LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-4周Fumarate hydratase/FH  富馬酸水合抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-CHK2 (Thr387)  磷酸化細胞周期檢測點激2抗體 規(guī)格: 0.1ml

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??略?/span>;Hecogenin 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢 KiMA(人胚腎上細胞系)5×106cells/瓶×2

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白當歸腦 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg 大腦亮氨拉鏈結構域蛋白抗體 PCDH9 ELISA Kit 原鈣黏素9(PCDH9)ELISA試劑盒

 


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