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商品屬性：

細胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人腺二核苷酸(NAD)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

白M(IgM)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人肌聯(lián)蛋白(TTN)抗體免疫試劑盒進口、組裝

人白介素1受體相關(guān)激1(IRAK1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

犬堿性(ALP)免疫試劑盒進口、分裝

雞熱休克蛋白60(Hsp-60)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠酐(CA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)免疫試劑盒進口、組裝

鯊魚Cortisol)免疫試劑盒進口、組裝

慶大瓊脂 英文名稱：Gentamycin Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g

大鼠主動脈內(nèi)皮細胞Salmonella abortus ovis羊流產(chǎn)沙門氏探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Donkey Anti-human IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1mlCaspase-9  白介素1-β轉(zhuǎn)化樣凋亡蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1ml

Radix aconiti kusnezoffii草烏LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周SOD1/SOD  超氧化物歧化1抗體(銅/鋅過氧化物歧化SOD) 規(guī)格: 0.1mlATG4D  自噬相關(guān)蛋白4D抗體 規(guī)格: 0.2ml

Tropiladaps clareae亮熱厲螨（小蜂螨?。㎜AMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Wnt11  信號通路Wnt11抗體 規(guī)格: 0.1mlCCDC87  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白87抗體 規(guī)格: 0.2ml

Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周PAP2c/AP2-gamma  磷脂酸磷酸2C抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-Crk p38 (Tyr221)  磷酸化Crk p38抗體 規(guī)格: 0.1ml

St.Louis Encephalitis Virus(SLEV)圣路易斯腦炎病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周FbxL12  FBXL12蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-human IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

Trichodysplasia Spinulosa Associated Polyomavirus(TSPyV) TS多瘤病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Sprouty 2  快速發(fā)育生因子同源蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlApollon/BIRC6  Apollon凋亡抑制蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Borrelia recurrentis回歸熱疏螺旋體（回歸熱包柔螺旋體）LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周NEEP21  NEEP21蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlPatched/PTCH  Patched/PTCH抗體 規(guī)格: 0.1ml

Xiphinema cobb劍線蟲PCR試劑盒屬 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周NEK3  絲/蘇蛋白激Nek3抗體 規(guī)格: 0.2mlSCNN1D/δENaC  上皮鈉離子通道蛋白D抗體 規(guī)格: 0.2ml

Herba epimedii淫羊藿PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周phospho-Crkl (Tyr207)  磷酸化接蛋白CrkL抗體 規(guī)格: 0.1ml

Staphylococcus chromogenes產(chǎn)色葡萄球LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周SHIP1  SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1抗體 規(guī)格: 0.2ml

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。