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貨號	BJ-X97440

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產(chǎn)品名稱	卵巢癌組織源細胞
規(guī)格	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號	BJ-X97440

商品屬性：

名稱 卵巢癌組織源細胞

2.組織來源：卵巢癌組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

人卵巢癌組織源細胞分離自患有卵巢癌病人的卵巢癌組織；卵巢癌是卵巢腫瘤的一種惡性腫瘤，是指生長在卵巢上的惡性腫瘤，其中90%～95%為卵巢原發(fā)性的癌，另外5%～10%為其它部位原發(fā)的癌轉移到卵巢。由于卵巢癌早期缺少癥狀，即使有癥狀也不特異，篩查的作用又有限，因此早期診斷比較困難，就診時60%～70%已為晚期，而晚期病例又療效不佳。因此，雖然卵巢癌的發(fā)病率低于宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌居婦科惡性腫瘤的第三位，但死亡率卻超過宮頸癌及子宮內(nèi)膜癌之和，高居婦科癌癥，是嚴重威脅婦女健康的最大疾患。卵巢由于組織學的特點，其癌的組織學類型之多居全身各器官。卵巢腫瘤主要的組織學類型如下：來源于卵巢的生發(fā)上皮，具體類型包括漿液性瘤、粘液性瘤、子宮內(nèi)膜樣瘤、透明細胞瘤、纖維上皮瘤（又稱勃勒納瘤）、混合型上皮瘤等。來源于卵巢的生殖細胞。主要類型有畸胎瘤、無性細胞瘤、胚胎性癌、內(nèi)胚竇瘤、絨毛膜癌、混合性生殖細胞瘤。來源于卵巢的特異性性索間質(zhì)，包括顆粒細胞瘤、卵泡膜細胞瘤、纖維瘤、卵巢睪九母細胞瘤、兩性母細胞瘤等。來源于原發(fā)在其它器官的惡性腫瘤，常見的包括消化道和婦科其它器官。

5.方法簡介：

()實驗室分離的癌組織源細胞采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實驗室分離的人卵巢癌組織源細胞經(jīng)檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-H141

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

圖片13.jpg

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

人同型半胱(Hcy)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

人可溶性CD44變體9(sCD44-v9)免疫試劑盒進口、組裝

人甘免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

牛心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

猴子內(nèi)皮素1(ET-1)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠膜相關磷脂A2(PLA2G2A)免疫試劑盒進口、組裝

大鼠P0蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

BAT培養(yǎng)基英文名稱：BAT Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g

測定培養(yǎng)基英文名稱：Folic Acid Assay Me

卵巢癌組織源細胞Fusarium graminearum禾谷鐮刀PCR試劑盒植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周CXCR6 細胞表面趨化因子受體6抗體規(guī)格: 0.1ml

Rhizoma atractylodis蒼術PCR鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-4周RNF180 環(huán)指蛋白180抗體規(guī)格: 0.2ml

Pseudomonas spp.假單胞屬通用LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周Phospho-Rb(Thr826) 磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml

Ovine Astrovirus 1(OAstV)綿羊星狀病毒1型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周phospho-MEK2(Ser226) 磷酸化絲裂原活化蛋白激激2抗體規(guī)格: 0.1ml

Flos mume梅花染料法PCR鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-4周SPAG8 子相關抗原8抗體規(guī)格: 0.2ml

Avian Myelocytoma Virus(AMV)鳥類髓瘤病毒RT-LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周TSHB(2T11) 促甲狀素單克隆抗體規(guī)格: 0.1ml

Staphylococcus hyicus豬葡萄球探針法熒光定量PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周RNF34 環(huán)指蛋白34抗體規(guī)格: 0.2ml

Rhizoma typhonii白附子LAMP鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-4周C1orf31 1號染色體開放閱讀框31抗體規(guī)格: 0.2ml

Mycoplasma iowae衣阿華支原體LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周TRP2 酪相關蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml

Herpesvirus of Turkey (HVT) 火雞皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周phospho-p53BP1(Ser25/29) 磷酸化p53結合蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。