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貨號 | BJ-X97582 |
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細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
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產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | BJ-X97582 |
商品屬性:
名稱 大鼠牙齦上皮細胞 2.組織來源:牙齦組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 大鼠牙齦上皮細胞分離自牙齦組織;牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織,呈粉紅色、有光澤、質堅韌。牙齦邊緣稱為齦緣,正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒齦,通稱牙床;是指包住齒頸的黏膜組織,粉紅色,內有很多血管和神經(jīng)。牙齦上皮長期被認為是抵御口腔中持續(xù)存在的細菌的被動免疫屏障,隨著對牙周致病菌的不斷認識,發(fā)現(xiàn)牙齦上皮不僅僅是抵御微生物的物理屏障,上皮細胞還可以分泌抗菌多肽,參與先天性免疫。牙齦上皮作為牙周組織的第一道屏障,在抵御牙周炎細菌入侵的過程中發(fā)揮了重要作用,建立正常牙齦上皮細胞體外培養(yǎng)體系,將為各種牙齦上皮相關的研究提供穩(wěn)定的實驗模型。 5.方法簡介: ()實驗室分離的大鼠牙齦上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: ()實驗室分離的大鼠牙齦上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R193 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
大鼠轉鐵蛋白(TF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
牛甘油酸酯激2(PGK2)免疫試劑盒進口、分裝
雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(NAG)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠高敏三碘甲狀腺原(u-T3)免疫試劑盒進口、分裝
倉鼠白介素2(IL-2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管(含小倒管) 英文名稱:Double Lactose Bile Ferment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:10ml*20支
馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:Potato Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
豬胰蛋白(Trypsin)ows\system32\EhStorShell.dll
大鼠牙齦上皮細胞Fusarium equiseti木賊鐮刀探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CHK1/CHEK1 細胞周期檢測點激1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Arisaema cum bileLAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Mouse Anti-rabbit IgG/Cy3 Cy3標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
Taylorella equigenitalis馬生殖泰勒氏LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-ATRIP (Ser68+Ser72) 系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關蛋白TREX1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mecistocirrus digitatus牛捻轉胃蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周MUL1/RNF218 E3泛素連接MUL1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Enteric Virus-72(EV-72)腸道病毒72型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-ROCK2(Tyr256) 磷酸化Rho相關蛋白激2抗體 規(guī)格: 0.1ml
甲型流感()H1N1/H3亞型雙重染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周AHNAK2 AHNAK核蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Poliovirus(PV)脊髓灰質炎病毒通用型RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-NFKB1(Ser903) 磷酸化細胞核因子p50/k基因結合核因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
貓源性成分PCR檢測試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周E2EPF 泛素交聯(lián)抗體 規(guī)格: 0.2ml
Herba lobeliae chinensis半邊蓮染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周CADM3/IGSF4B 細胞粘附分子3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Salmonella dublin都柏林沙門氏LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-Bov IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.3ml
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