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貨號	BJ-X97071

培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

商品屬性：

產品名稱	規(guī)格	貨號
	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶	BJ-X97071

商品介紹：

名稱 大鼠胰腺星狀細胞

2.組織來源：胰腺組織

3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠胰腺星狀細胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星狀細胞（PSC）是胰腺纖維化的主要效應細胞，PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴，并表達Desmin蛋白，活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白（alpha-SMA）。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種，并分別具有特異的標志物。靜息狀態(tài)PSC胞質內富含的A脂滴可以被油紅O染成紅色，陽性表達Desmin。激活狀態(tài)PSC陽性表達alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現(xiàn)，原代分離的細胞培養(yǎng)6d，胞漿中仍可見明顯的脂滴，傳代后，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細胞化學染色顯示，細胞接種24h仍然表達Desmin，48h后Desmin基本不再表達。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細胞開始表達alpha-SMA，隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數(shù)的增加，細胞表達alpha-SMA，而不再表達Desmin，說明細胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程，至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細胞激活，傳代后細胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型，目前研究發(fā)現(xiàn)：胰腺受損時，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化，導致細胞形態(tài)、功能發(fā)生變化，促使基質增生、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠胰腺星狀細胞采用膠原酶制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的大鼠胰腺星狀細胞經α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產品貨號CM-R016

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳2-3代

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

人 JAM-A / F11R ELISA配對抗體

人 Granulin / GRN / Progranulin ELISA配對抗體

人 COMP / TSP5 ELISA配對抗體

人 DKK3 / Dkk-3 / REIC ELISA配對抗體

人 vWF / von Willebrand Factor ELISA配對抗體

人 PD1 / PDCD1 / CD279 ELISA配對抗體

人 CD48 / SLAMF2 / BCM1 ELISA配對抗體

人 CD157 / BST1 ELISA配對抗體

人 C

大鼠胰腺星狀細胞Aethina tumida蜂房小甲蟲探針法熒光定量PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周TCHP 抑蛋白TCHP抗體規(guī)格: 0.2mlRenalase 胺抗體規(guī)格: 0.2ml

Lumpy Skin Disease Virus(LSDV)疙瘩皮膚病病毒PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用） 50次低溫負20度一年 2-4周envelope glycoprotein (Yellow fever virus) 黃包膜糖蛋白抗體規(guī)格: 0.2mlphospho-PI3K/PIK3CD(Tyr524) 磷酸化磷脂酰肌醇激催化亞單位D抗體規(guī)格: 0.1ml

Pheretima地龍LAMP鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-4周HAS3 透明質酸合成3抗體規(guī)格: 0.2mlIL-7 白介素7抗體規(guī)格: 0.1ml

Gallibacterium anatis鴨源雞桿LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周PARD6B 缺陷性分配同源物β抗體規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-chicken IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.1ml

Mycobacterium spp.分枝桿屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周MVD 甲羥戊酸脫羧抗體規(guī)格: 0.1mlSnake poison Protein 蛇毒蛋白抗體（中華眼鏡蛇）規(guī)格: 0.2ml

Bovine Herpes Mammillitis Virus(BHMV)牛皰疹炎病毒染料法熒光定量PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周ARRDC4 抑制蛋白結構域蛋白4抗體規(guī)格: 0.2mlADK/AK 苷酸激抗體 0.1ml

Chicken Astrovirus (CAstV) 雞星狀病毒染料法熒光定量PCR試劑盒定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周Uricase 尿酸規(guī)格: 0.1mlCD2 CD2抗體規(guī)格: 0.1ml

Corynebacterium pseudotuberculosis偽結核棒桿LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周CD63/MLA1 黑色素瘤相關抗原抗體規(guī)格: 0.1mlMCM5 微小染色體維持缺陷蛋白5抗體規(guī)格: 0.1ml

豚鼠源性成分PCR檢測試劑盒種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周KDM5B/PLU1/Jarid1B 組蛋白去甲基化JARID1B抗體規(guī)格: 0.2mlGLUR3/GRIA 3 谷受體3抗體規(guī)格: 0.1ml

Herba menthae薄荷染料法PCR鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-4周Dnmt1 DNA甲基轉移1抗體規(guī)格: 0.1mlKT3 tag KT3 tag抗體規(guī)格: 0.1ml