我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價，貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。

商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人苗條素受體(LR/Ob-R)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

白重鏈(IgH)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

人精脒/精胺N(1)-乙酰轉(zhuǎn)移樣蛋白1(SATL1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)抗體(IgG)免疫試劑盒*直銷

人P0蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒*直銷

犬CD4分子(CD4)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

雞三碘甲狀腺原(T3)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化(ACE)免疫試劑盒*直銷

大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠E3-RSIκB 免疫試劑盒進(jìn)口、?

小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Salmonella dublin都柏林沙門氏探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Annexin Ⅲ  膜粘連蛋白A3抗體 規(guī)格: 0.1mlTPH/Trptophan Hydroxylase   色羥化抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rhizoma bletillae白及LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周CIDE B  DNA斷裂因子相似蛋白B抗體 規(guī)格: 0.2mlDog IgM  兔抗犬IgM抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mycoplasma mycoides subsp(mycoides SC)絲狀支原體絲狀亞種SC型LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周UBE2E2  泛素蛋白連接2E2抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-human sIgA/Cy3  Cy3標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1ml

Astrovirus(AV)星狀病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Phospho-c-Kit(Ser741)  磷酸化原基因c-kit抗體 規(guī)格: 0.1mlPDHX  丙酮酸脫復(fù)合物X蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rhizoma atractylodis蒼術(shù)LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周Rabbit Anti-human IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.1mlFAM135B  FAM135B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Brucella spp.布魯氏桿屬通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周STAT2  信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體 規(guī)格: 0.1mlGPCR GPR97  G蛋白偶聯(lián)受體97抗體 規(guī)格: 0.2ml

Inhangapi病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周BAAT1/C7orf27  7號染色體開放閱讀框27抗體 規(guī)格: 0.2mlBRD7  鼻咽相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Xanthomonas campestris pv. campestris野油菜黃單胞野油菜致病變種PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周KMT3B/NSD1/ARA267  組蛋白甲基化KMT3B抗體（雄激素受體激活蛋白） 規(guī)格: 0.2mlphospho-Histone H1(Thr146)  磷酸化組蛋白H1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Sanguis draxonis血竭PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周CEBP Beta  轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體 規(guī)格: 0.1mlATXN3L  小腦脊髓共濟(jì)失調(diào)蛋白3抗體 0.2ml

Bartonella henselae漢氏巴爾通體（漢塞巴爾通體、貓抓病、貓抓熱）LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-Rabbit IgM/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格: 0.1ml

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。