當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氮代謝系列>> 天冬酰胺合成酶測試盒100管/96樣
貨號 | BJ-01S9701 |
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
微量法 | 100管/96樣 | BJ-01S9701 |
商品介紹:
測定意義:
天冬酰胺合成酶是廣泛存在于生物體內(nèi)的一類氨基轉(zhuǎn)移酶,催化谷氨酞胺的氨基向天冬轉(zhuǎn)移。當植物處于氨毒時天冬酞胺的形成是一種解毒反應(yīng)。測定原理:
AS催化L-天冬酰胺水解成L-天冬和氨,利用奈氏試劑檢測氨增加的速率,即可計算其酶活性。
需自備儀器和用品:
臺式離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、冰和雙蒸水。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
人 SMPD2 基因全長ORF克隆
人 GATM 基因全長ORF克隆
人 B3GALT2 基因全長ORF克隆
人 UXS1 基因全長ORF克隆
人 CKMT2 基因全長ORF克隆
人 PSMC4 基因全長ORF克隆
人 KDM8 基因全長ORF克隆
人 ELK3 基因全長ORF克隆
人 DCTN2 基因全長ORF克隆
人 TGIF1 基因全長ORF克隆
天冬酰胺合成酶測試盒100管/96樣山羊胰島素(INS)免疫試劑盒*直銷
山羊血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)免疫試劑盒進口、組裝
山羊血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒進口、分裝
山羊血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
山羊血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)免疫試劑盒*直銷
山羊血管緊張素轉(zhuǎn)化(ACE)免疫試劑盒進口、組裝
山羊血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒進口、分裝
山羊血管緊張素Ⅰ(ANG-Ⅰ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
山羊褪黑素(MT)免疫試劑盒*直銷
山羊銅藍蛋白(CP)免疫試劑盒進口、組裝
山羊瘦素(LEP)免疫試劑盒進口、分裝
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
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