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貨號(hào)	BJ-X97526

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產(chǎn)品名稱	大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞
規(guī)格	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)	BJ-X97526

商品屬性：

名稱 大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞

2.組織來(lái)源：淋巴結(jié)

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞分離自淋巴結(jié)；淋巴結(jié)是哺乳類*的周圍淋巴器官，由淋巴細(xì)胞集合而成。呈豆形，位于淋巴管行進(jìn)途中，是產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重要器官之一。淋巴結(jié)表面包有被膜，被膜的結(jié)締組織伸入淋巴結(jié)內(nèi)形成小梁，構(gòu)成淋巴結(jié)的支架。被膜下為皮質(zhì)區(qū)，淋巴結(jié)的中心及門部為髓質(zhì)區(qū)。皮質(zhì)區(qū)有淋巴小結(jié)、彌散淋巴組織和皮質(zhì)淋巴竇（簡(jiǎn)稱皮竇），髓質(zhì)包括由致密淋巴組織構(gòu)成的髓索和髓質(zhì)淋巴竇（簡(jiǎn)稱髓竇）。淋巴竇的竇腔內(nèi)有許多淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，從輸入淋巴管流來(lái)的淋巴液先進(jìn)入皮竇再流向髓竇，最后經(jīng)輸出淋巴管離開(kāi)淋巴結(jié)。淋巴結(jié)的主要功能是濾過(guò)淋巴液，產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞，參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。淋巴結(jié)腫大或疼痛常表示其屬區(qū)范圍內(nèi)的器官有炎癥或其他病變。主要功能是濾過(guò)淋巴液，產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞，參與機(jī)體的免疫反應(yīng)；當(dāng)局部感染時(shí)，細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞等可沿淋巴管侵入，引起局部淋巴結(jié)腫大。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們，則病變可沿淋巴管的流注方向擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞是白細(xì)胞的一種，由次級(jí)淋巴器官淋巴結(jié)產(chǎn)生，是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分；細(xì)胞為圓形細(xì)胞核，細(xì)胞質(zhì)少。成熟淋巴細(xì)胞需依賴抗原刺激而分化增殖，繼而發(fā)揮其免疫功能。

5.方法簡(jiǎn)介：

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞采用分離淋巴結(jié)組織、研磨獲取單細(xì)胞懸液后通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為1×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)檢測(cè)，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號(hào)CM-R172

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性懸浮

細(xì)胞形態(tài)圓形

傳代特性不增殖；不傳代

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

圖片13.jpg

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

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大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞Radix pseudostellariae參PCR鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-4周Rabbit Anti-Bov IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.5ml

Porcine Paramyxovirus豬副粘病毒RT-LAMP試劑盒動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周C2CD4C/NLF3 限局性核因子3抗體規(guī)格: 0.2ml

Vibrio mimicus擬態(tài)弧探針?lè)晒舛縋CR試劑盒動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周CD20 CD20抗體規(guī)格: 0.1ml

Herba agrimoniae仙鶴草PCR鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-4周Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 0.1ml

Human Papillomavirus 11(HPV-11)人瘤病毒11LAMP試劑盒動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周Troponin T/c 心肌特異性肌鈣蛋白T抗體規(guī)格: 0.1ml

Influenza Virus A甲型流感（）病毒通用探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周BPGM 紅細(xì)胞2,3 - 二磷酸甘油酸合成抗體規(guī)格: 0.2ml

Tilletia indica Mitra小麥印度腥黑穗病PCR試劑盒植物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周CDCA1/Nuf2 細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

Semen ziziphi spinosae酸棗仁PCR鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-4周GRM2+GRM4 促代謝型谷受體2+4抗體規(guī)格: 0.2ml

Tai Forest Ebola Virus(TAFV)大森林埃博拉病毒RT-LAMP試劑盒動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

Burkholderia cepacia洋蔥伯克氏探針?lè)晒舛縋CR試劑盒動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周phospho-Tau protein(Ser202) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。