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貨號 | BJ-X97346 |
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細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
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產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | BJ-X97346 |
商品屬性:
名稱 軟骨細胞 2.組織來源:軟骨組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 人軟骨細胞分離自軟骨組織;軟骨組織由軟骨細胞、基質(zhì)及纖維構(gòu)成。軟骨組織再生能力強,這些增生的幼稚細胞形似纖維母細胞,以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣毎?,并形成軟骨基質(zhì),細胞被埋在軟骨陷窩內(nèi)而變?yōu)殪o止的軟骨細胞。根據(jù)軟骨組織內(nèi)所含纖維成分的不同,可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種,其中以透明軟骨的分布較廣,結(jié)構(gòu)也較典型。軟骨細胞(chondrocyte)位于軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的軟骨細胞位于軟骨組織的表層,單個分布,體積較小,呈橢圓形,長軸與軟骨表面平行,越向深層的軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形,染色淺,細胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。 5.方法簡介: ()實驗室分離的人軟骨細胞采用膠原酶-聯(lián)合消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: ()實驗室分離的人軟骨細胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H107 換液頻率每2~3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
人磷脂轉(zhuǎn)運蛋白(PLTP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
大鼠組織因子(TF)前體 免疫試劑盒進口、分裝
大鼠凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試劑盒進口、分裝
魚烯醇丙酮酸羧激,線粒體(PCK2)免疫試劑盒*直銷
Voges-Proskauer(V-P)試劑 英文名稱:V-P Box 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*4
梭菌強化培養(yǎng)基 英文名稱:Reinforced medium for clostridia 產(chǎn)品規(guī)格:250g
硅酸鹽細菌培養(yǎng)基 英文名稱:Silicat?
軟骨細胞Semen euryales芡實探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周DNMBP 動力結(jié)合蛋白DNMBP抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-Ret/HSCR1(Tyr1062) 磷酸化原基因酪蛋白激受體RET抗體 規(guī)格: 0.1ml
Trypanosoma brucei rhodesiense布氏羅得西亞錐蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-Nrf2 (Ser40) 磷酸化核因子2相關(guān)因子2(Ser40)抗體 規(guī)格: 0.1mlCrk p38 /CRK Crk p38抗體 規(guī)格: 0.2ml
Grass Carp Reovirus(GCRV)草魚呼腸孤病毒毒通用探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周HPV18 E6 人類狀瘤毒18 E6抗體 規(guī)格: 0.2mlGPR71/T1R2 蛋白偶聯(lián)受體71抗體 規(guī)格: 0.2ml
Bursaphelenchus xylophilus松材線蟲LAMP試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周MMP-10 基質(zhì)金屬蛋白-10抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-FAK(Tyr861) 磷酸化粘著斑激抗體 規(guī)格: 0.1ml
火雞源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-EGFR (Ser1026) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1mlCD13/APN/ANPEN CD13氨肽N抗體 規(guī)格: 0.1ml
Calymmatobacterium granulomatis肉芽腫鞘桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Donkey Anti-rabbit IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1mlPhospho-IRAK1 (Ser376) 磷酸化白介素-1受體相關(guān)激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Potato Virus M(PVM)馬鈴薯病毒M型RT-PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周GIMAP7 GTPIMAP家族成員7抗體 規(guī)格: 0.2mlC2orf68 2號染色體開放閱讀框68抗體 規(guī)格: 0.2ml
Ganoderma靈芝PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周CCDC70 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70抗體 規(guī)格: 0.2mlTRIM29/ATDC 共濟失調(diào)毛細管擴張癥D相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Sarcocystis spp.肉孢子蟲通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周PSGD/HOXB13 同源盒蛋白HOXB13抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-HDAC7 (Ser318) 磷酸化組蛋白去乙?;?抗體 規(guī)格: 0.1ml
Streptococcus oralis口腔鏈球探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlIL-13Ra1 白細胞介素-13受體a1抗體 規(guī)格: 0.1ml
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