即森林腦炎病毒PCR熒光定量檢測試劑盒-上海邦景實業(yè)有限公司

產地	國產	加工定制	否
適用領域	科研	貨號	BJ-P6765

操作流程

1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。

3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。

4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。

5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。

6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。

7. 儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。

9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產品名稱	英文名稱	規(guī)格	貨號
即森林腦炎病毒PCR熒光定量檢測試劑盒	Forest Encephalitis Virus(SFV)RTPCR	多種規(guī)格	BJ-P6765

特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。

3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。

6. 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

儲存條件：-20℃以下，有效期12個月。

PCR檢測試劑盒 (2).jpg

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer 5μl

dNTP mixl 4μl

引物1（10pM） 2μl

引物2（10PM） 2μl

Taq酶（2U/μl） 1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

三、注意事項

１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。

２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。

３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。

萋-尼氏染色液 5ml*6

2 ug pEGFP- N1 pEGFP- N1 低溫運輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人粒巨噬集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒

100mL Bradford法蛋白定量試劑盒 Bradford Protein Assay Kit 常溫保存，BSA標準需要-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Lymphocyte function-associated antigen 3

MS培養(yǎng)基（不含有機元素，不含瓊脂和蔗糖） 250g

RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基（2015藥典） RV Salmonella Enrichment Medium 250g 78-5000 pg/mL 轉基因植物PRSV基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

2 ug pAcAd5 9.2-100 pAcAd5 9.2-100 低溫運輸，-20℃保存

5g 氫化松 Hydrocortisone

2 ug pcDNA3.1（+）/GFP pcDNA3.1（+）/GFP 低溫運輸，-20℃保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Carboxypeptidase M

50次柱式動物RNAout Column Animal RNAOUT 4℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Annexin A6

HBI沙門氏菌生化鑒定條(GB) 5條/盒 0.312-20 ng/mL 人波形蛋白(Vimentin)ELISA試劑盒

1瓶 CCC-HEK-1株 CCC-HEK-1 低溫運輸和保存 15.6-1000 pg/mL 人血清淀粉樣P物質(SAP)ELISA試劑盒

即森林腦炎病毒PCR熒光定量檢測試劑盒遠志皂苷B標準品英文別名： presenegenin-(3)-β-D-glucopyranosido-(28)-2-O-[β-D-galactopyranosyl (1→4)-β-D-xylopyranosyl (1→4)-α-L-rhamnopyranosyl]-3-O-(α-L-rhamnopyranosyl)-4-O-(4 英文名： Onjisaponin B 登錄號： 35906-36-6 分子式： C80H120O39 分子量： 1705.79 分子結構：

藤黃酸標準品登錄號： 2752-65-0 英文別名： 1,5-methano-1h,3h,11h-furo(3,4-g)pyrano(3,2-b)xanthene-1-crotonicacid,3a,4,5,;3,3,11-tetramethyl-13-(3-methyl-2-butenyl)-11-(4-7-tetrahydro-8-hydroxy-alph 分子式： C38H44O8 分子量： 628.75 分子結構：外觀：橙色結晶

雷酚內酯標準品英文別名： (3bR,9bS)-3b,4,5,9b,10,11-Hexahydro-6-hydroxy-9b-methyl-7-(1-methylethyl)phenanthro[1,2-c]furan-1(3H)-one 英文名： Triptophenolide 登錄號： 74285-86-2 分子式： C20H24O3 分子量： 312.4 分子結構：

伏波酯-12-十四烷酸酯-13-乙酸酯標準品分子式： C36H56O8 登錄號： 16561-29-8 分子量： 616 分子結構：外觀：白色晶體規(guī)格： 20 mg/支

伏波酯-12-惕各酸酯-13-異丁酸酯標準品分子式： C29H40O8 登錄號： 92214-54-5 分子量： 516 分子結構：外觀：白色晶體規(guī)格： 20 mg/支

Presapogenin CP4標準品分子式： C46H74O15 登錄號： 75799-18-7 分子量： 866 分子結構：外觀：白色晶體規(guī)格： 20 mg/支

5補充中2標準品分子式： C41H66O12 登錄號： 123350-57-2 分子量： 750 分子結構：外觀：白色晶體規(guī)格： 20 mg/支

5補充中3標準品分子式： C41H66O12 登錄號： 60213-69-6 分子量： 750 分子結構：外觀：白色結晶規(guī)格： 20 mg/支

11-羥基柳杉酚標準品分子式： C20H28O3 登錄號： 88664-08-8 分子量： 316 分子結構：外觀：淡黃色結晶規(guī)格： 20 mg/支