操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價，貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。

商品屬性：

細胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人電壓門控鉀通道抗體(VGKC-ab)免疫試劑盒進口、分裝

人Prominin 2(PROM2)免疫試劑盒進口、分裝

犬N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(NAG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

雞糖皮質(zhì)激素(GC)免疫試劑盒*直銷

大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒*直銷

大鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1(GPBAR1)免疫試劑盒*直銷

改良馬丁培養(yǎng)基顆粒 英文名稱：Martin Medium, Modified 產(chǎn)品規(guī)格：300ml/袋*10

BPL瓊脂 英文名稱：BPL Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250

小鼠頜下腺上皮細胞Radix et caulis acanthopanacis senticosi刺五加探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周KEAP1/KLHL19  胞質(zhì)接蛋白Keap1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Fasciola magna大擬片形吸蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周MARCH3  膜相關(guān)環(huán)指蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Human Immunodeficiency Virus 1(HIV-1M-C)人免疫缺陷病毒1型M群C型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-P53(Ser33)  磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1ml

Flos buddlejae密蒙花染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周ANKHD1  艾滋毒制約錨定蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Macrococcus canis犬巨球LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-Ezrin (Thr567)  磷酸化埃茲蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlCBP/p300  CREB結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Acinetobacter lwoffi魯氏不動桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-NDEL1(Ser231)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgM/Cy7  Cy7標記的兔抗馬IgM 規(guī)格: 0.1ml

Ditylenchus dipsaci鱗球莖莖線蟲PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-human IgM/HRP  辣根過氧化物標記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.1mlRNF144  E3泛素蛋白連接144A抗體 規(guī)格: 0.2ml

Radix paeoniae alba白芍PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Hyaluronidase3  透明質(zhì)酸2/玻璃酸2抗體 規(guī)格: 0.2mlkatanin p80  劍蛋白p80抗體 規(guī)格: 0.2ml

Chlamydophila pneumoniae 肺炎嗜衣原體LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ARL3  ADP核糖基化樣因子ARL3抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-cdc25A (Ser292)  磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體 規(guī)格: 0.1ml

Edwardsiella spp.愛德華氏通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Cryopyrin/CIAS1/NALP3  細胞凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-Chicken IgG/HRP  辣根過氧化物標記的羊抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml