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商品屬性：

細胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

兔子腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體3(TRAIL-R3)免疫試劑盒進口、組裝

人突觸泡蛋白(SYP)免疫試劑盒現貨供應

人抗心肌β1受體(MB1R)自身抗體免疫試劑盒現貨供應

人對氧磷-3(PON3)免疫試劑盒進口、組裝

人B細胞生長因子(BCGF)免疫試劑盒進口、組裝

綿羊白介素8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠纖維蛋白原β鏈(Fgb/Ab1-181/Ab1-216/Ac1-581)免疫試劑盒現貨供應

大鼠抵抗素樣α(Retnla)免疫試劑盒進口、組裝

鯽魚卵黃蛋白原(VTG)免疫試ows\system32\EhStorShell.dll

兔肝內膽管上皮細胞Inhangapi病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周TRPM8  “冷"蛋白TRPM8抗體 規(guī)格: 0.2mlCTGFL  結締組織生因子樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Capillaria caudinflata平尾毛細線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周PNMT  苯乙醇胺甲基轉移抗體 規(guī)格: 0.2mlSIRT7  沉默調節(jié)樣蛋白SirT7抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rhizoma et radix notopterygii羌活探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周FRMD6  FRMD6蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlHNF4/TCF4/HNF4A  肝細胞核因子4α抗體 規(guī)格: 0.1ml

Afipia spp.阿菲波屬通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周LATS2  瘤抑制基因LATS2抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-human IgM/Gold  膠體金標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 2ml

Bundibugyo Ebola Virus(BDBV)本迪布焦型埃博拉病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-dog IgG/PE  PE標記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-pig IgG/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗豬IgG 規(guī)格: 0.1ml

Herba artemisiae annuae青蒿探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Calmodulin/CaM I  鈣調節(jié)素抗體（鈣調蛋白/鈣調素） 規(guī)格: 0.1mlphospho-SIRT6(Ser338)  磷酸化沉默調節(jié)相關蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1ml

Eperythrozoon suis豬附紅  體（豬嗜血支原體）PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用） 50次 低溫 負20度 一年 2-3周C16orf48  16號染色體開放閱讀框48抗體 規(guī)格: 0.2mlFBXL3  FBXL3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Encephalomyocarditis Virus(EMCV) 腦心肌炎病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周HDAC8  組蛋白去乙酰化8抗體 規(guī)格: 0.2mlJMJD1B  組蛋白去甲基轉移JMJD1B抗體 規(guī)格: 0.1ml

Theileria uilenbergi尤氏泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CD21/EBV receptor  2型補體受體抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-MEK1/2(Ser222)  磷酸化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Fructus jujubae大棗染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Mouse Anti-human IgM/APC  APC標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1mlTIF1 beta/KAP1/TRIM28  轉錄中介因子Tif1β抗體 規(guī)格: 0.1ml

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。