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產(chǎn)地	國(guó)產(chǎn)	加工定制	否
適用領(lǐng)域	科研	貨號(hào)	BJ-P6753

操作流程

1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。

3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。

4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。

6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

7. 儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。

9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱	英文名稱	規(guī)格	貨號(hào)
貓白血病毒PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒	Feline Leukemia Virus(FeLV)PCR	多種規(guī)格	BJ-P6753

特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

儲(chǔ)存條件：-20℃以下，有效期12個(gè)月。

PCR檢測(cè)試劑盒 (2).jpg

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer 5μl

dNTP mixl 4μl

引物1（10pM） 2μl

引物2（10PM） 2μl

Taq酶（2U/μl） 1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

三、注意事項(xiàng)

１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。

２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。

３．所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。

４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。

LG培養(yǎng)基 (Linden Grain Medium) 250g

0.5mL dNTP溶液，100 mM dNTP Solution，100 mM -20℃保存 62.5-4000 pg/mL 牛(BCV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span style="font-size: 14px; font-family: Calibri;">)

250mg 四唑紫 INT(Iodonitrotetrazolium Chloride) 4℃避光保存 78-5000 pg/ml 人內(nèi)皮素2（ ET-2/EDN2）ELISA試劑盒

2 ug pLAMBLA1305.2 pLAMBLA1305.2 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.312-20 nmol/mL 甘油三脂(Triglyceride)ELISA試劑盒

2 ug pKK 223-3批次1 pKK 223-3批次1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 1.56-100 ng/mL B1(Vitamin B1)ELISA試劑盒

250mL Formalin-Acetic Acid Solution Formalin-Acetic Acid Solution 常溫保存 3.12-200 ng/mL ELISA Kit for Human Cytochrome c oxidase subunit 4 isoform 1, mitochondrial

10次 Southern級(jí)細(xì)菌(G-)DNAout 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Peroxisome proliferator-activated receptor delta

革蘭氏染色液試劑盒 Gram Staining Kit 5ml*8 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Mu-type opioid receptor

50mL Nickel Chloride Solution（氯化鎳溶液）,0.5M Nickel Chloride Solution,0.5M 常溫保存 0.312-20 ng/mL 人金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1(ADAMTS1) ELISA試劑盒

李斯特氏菌增菌肉湯（LEB） Listeria Enrichment Broth 250g 0.312-20 ng/mL 綠膿桿菌(PA)核酸檢測(cè)試劑盒

2 ug pTAL-Luc pTAL-Luc 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Angiopoietin-1

貓白血病毒PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒羽扇豆醇標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C30H50O英文名： Lupeol分子量： 426.72號(hào)： 545-47-1檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

鳶尾黃素標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C16H12O6英文名： Tectorigenin分子量： 300.26號(hào)： 548-77-6檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

原阿片堿標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C20H19O5英文名： Protopine分子量： 353.37號(hào)： 130-86-9檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

原兒茶醛標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C7H6O3英文名：protocatechuic aldehyde分子量：138.12 號(hào)：139-85-5檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

原兒茶酸標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C7H6O4英文名：protocatechuic acid分子量：154.12 號(hào)：99-50-3檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

原花青素B1標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C30H26O12 英文名：Procyanidin B1分子量：578.52 號(hào)：20315-25-7檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：5mg 10mg 50mg 100mg 200mg (可根據(jù)客戶需求包裝)

原花青素B2標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C30H26O12 英文名：Procyanidin B2分子量：578.53 號(hào)：29106-49-8 檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：5mg 10mg 50mg 100mg 200mg (可根據(jù)客戶需求包裝)

原花青素標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C30H26O13英文名：proanthocyanidins分子量：578.53號(hào)：4852-22-6檢測(cè)方式：紫外分光光度法UV≥95%規(guī)格：10mg 20mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

原人參二醇標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C30H52O3英文名：Protopanaxdiol分子量：460.74108號(hào)：7755-01-3檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)