產(chǎn)品屬性：  

商品介紹：

測定意義:

順烏頭酸酶（aconitase），三羧酸循環(huán)中的酶，催化檸檬酸轉(zhuǎn)變?yōu)楫悪幟仕?。檸檬酸本身不易氧化，在順烏頭酸酶作用下，通過脫水與加水反應(yīng)，使羥基由β碳原子轉(zhuǎn)移到α碳原子上，生成易于脫氫氧化的異檸檬酸，為進一步的氧化脫羧反應(yīng)作準(zhǔn)備。

測定原理

ACO催化檸檬酸轉(zhuǎn)化成異檸檬酸，異檸檬酸氧化脫羧將NAD+ 還原生成NADH，導(dǎo)致340nm處光吸收上升。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

注意事項：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 （果糖含量測試盒說明書過過濾）。

4 ）. 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

人 GPR20 基因全長ORF克隆

人 GPR35 基因全長ORF克隆

人 RASGRF1 基因全長ORF克隆

人 ARHGAP10 基因全長ORF克隆

人 ADH1A 基因全長ORF克隆

人 TICAM2 基因全長ORF克隆

人 FLT1 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆

人 SIGLEC10 轉(zhuǎn)錄變體5 基因全長ORF克隆

人 PFKFB3 基因全長ORF克隆

人 ADCYAP1R1 基因全長ORF克隆

順烏頭酸酶測試盒50管/50樣人C(VC)免疫試劑盒進口、分裝

人B6(VB6)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人B3(VB3)免疫試劑盒*直銷

人B2(VB2)免疫試劑盒進口、組裝

人B12(VB12)免疫試劑盒進口、分裝

人B1(VB1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人A(VA)免疫試劑盒*直銷

人微管相關(guān)蛋白tau(MAPT)抗體免疫試劑盒進口、組裝

人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)免疫試劑盒進口、分裝

人微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3A(MAP1LC3A)免疫試劑盒*直銷

操作流程：

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。