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產(chǎn)地	國產(chǎn)	加工定制	否
適用領(lǐng)域	科研	貨號	BJ-P6689

操作流程

1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。

4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。

6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

7. 儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。

9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱	英文名稱	規(guī)格	貨號
腦心肌炎病毒PCR熒光定量檢測試劑盒	Encephalomyocarditis Virus(EMCV) RTPCR	多種規(guī)格	BJ-P6689

特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

儲存條件：-20℃以下，有效期12個月。

PCR檢測試劑盒 (2).jpg

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer 5μl

dNTP mixl 4μl

引物1（10pM） 2μl

引物2（10PM） 2μl

Taq酶（2U/μl） 1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

三、注意事項(xiàng)

１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。

２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。

３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。

250mL Diluting Solution，2X Diluting Solution，2X 常溫保存

MH瓊脂（MHA） Mueller-Hinton Agar 250g 0.78-50 ng/mL 馬鈴薯特定基因序列(PATA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

2 ug pLVX-DsRed-Monomer-N1 pLVX-DsRed-Monomer-N1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人絨毛蛋白(CVL)ELISA試劑盒

1mL 單裂解液（DNA） Single Cell Lysis Solution 4℃保存 1.56-100 U/L ELISA Kit for Human Calcitonin gene-related peptide 2

1瓶 HFL1株 HFL1 低溫運(yùn)輸和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Talin-2

100mL ACES Buffer，0.5M,pH7.0 ACES Buffer，0.5M,pH7.0 常溫保存GAM肉湯進(jìn)口、國產(chǎn)Anaerobic Broth250克用于專性厭氧菌培養(yǎng)

2 ug SD1211- 3 SD1211- 3 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 78-5000 pg/mL 人過氧化還原4(PRDX4)ELISA試劑盒

2 ug pRNATin-H1.2/Hygro pRNATin-H1.2/Hygro 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人α滑行蛋白(Alpha-taxilin)ELISA試劑盒

50次柱式細(xì)菌DNAout（含） Column Bacterial DNAOUT 常溫保存(需要-20℃保存) 1.56-100 ng/mL 人組織因子途徑抑制物2(TFPI-2)ELISA試劑盒

500mL Krebs-Ringer Solution [Bicarbonate Buffered] Krebs-Ringer Solution [Bicarbonate Buffered] 常溫保存 0.625-40 ng/mL 人載脂蛋白H(APOH)ELISA試劑盒

1000支 10 μL RNase-free 白吸頭（袋裝）常溫

腦心肌炎病毒PCR熒光定量檢測試劑盒大車前苷標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C29H36O16 英文名： Plantamajoside 分子量： 640.20 號： 104777-68-6 檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

大豆苷標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C21H20O9 英文名：Daidzin 分子量：416.38 號：552-66-9 檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

大豆苷元標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C15H10O4 英文名：Daidzein 分子量：254.24 號：486-66-8 檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

大黃酚標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C15H10O4 英文名：Chrysophanol 分子量：254.24 號：481-74-3 檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

大黃素標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C15H10O5 英文名：Emodin 分子量：270.24 號：518-82-1 檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

大黃素甲醚標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C16H12O5 英文名：Physcion 分子量：284.26 號：521-61-9 檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

大黃酸標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C15H8O6 英文名：Rhein 分子量：284.22 號：478-43-3 檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

大黃素-1-O-葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C21H20O10 英文名： Emodin-1-O-glucoside 分子量： 432.38 號： 38840-23-2 檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：10mg 20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C21H20O10 英文名： Emodin-8-glucoside 分子量： 432.41 號： 23313-21-5 檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格：10mg 20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)