操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

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商品屬性：

細胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人細胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠P53(P53)免疫試劑盒*直銷

Beta Lactams(β-內(nèi)酰胺)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大豆酪蛋白消化物瓊脂培養(yǎng)基USP 英文名稱：Tryptose Soya Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g

尿素 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)免疫試劑盒進口、組裝

小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)免疫試劑盒進口、組裝

人組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人胎球蛋白A(Fetuin A)免疫試劑盒進口、組裝?

小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞Bacillus cereus 蠟狀芽孢桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周SARS S-protein  抗表面S蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlMCM2  微小染色體維持缺陷蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Retinervus luffae fructus絲瓜絡(luò)染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周MGMT  O6甲基DNA甲基轉(zhuǎn)移抗體 規(guī)格: 0.2mlLH  人促黃體生成素抗體 規(guī)格: 0.1ml

Salmonella kentucky肯塔基沙門氏LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Donkey Anti-Goat IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.1mlPhospho-Cyclin B1(Ser133)  磷酸化周期素B1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒E亞群探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Synaptopodin  突觸極蛋白synaptopodin抗體 規(guī)格: 0.1mlRAD50  DNA修復(fù)蛋白Rad50抗體 規(guī)格: 0.2ml

Herba siegesbeckiae豨薟草染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周DIS3L2  有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體 規(guī)格: 0.2mlTbx21/T-bet  T細胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Tbx21抗體 規(guī)格: 0.1ml

鵝源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit anti-MG IgG/PE  PE標(biāo)記的兔抗爪沙鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlNonylphenol  壬基酚抗體 規(guī)格: 1ml

Prevotella spp.普雷沃屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CDK10  周期素依賴性激10 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-pig IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的兔抗豬IgG 規(guī)格: 0.1ml

Ovulinia azaleae杜鵑花枯萎病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周C21orf128  21號染色體開放閱讀框128抗體 規(guī)格: 0.2mlBAAT  鏈脂肪酸?；oA水解抗體 規(guī)格: 0.2ml

Ramulus uncariae cum uncis鉤藤PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周PLDL1/PLCE  磷脂C1樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlSENP5  泛素相關(guān)修飾蛋白特異性蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml

Human Immunodeficiency Virus 1(HIV-1M-K)人免疫缺陷病毒1型M群K型RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-Lyn (Tyr497)  磷酸化膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體 規(guī)格: 0.1mlCDK6  周期素依賴性激6抗體 規(guī)格: 0.1ml