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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>糖酵解系列>> 磷酸丙糖異構(gòu)酶測(cè)試盒50管/48樣
貨號(hào) | BJ-01S9807 |
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
紫外分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01S9807 |
商品介紹:
測(cè)定意義:
磷酸丙糖異構(gòu)酶是重要的糖酵解酶,廣泛存在于動(dòng)植物及微生物體內(nèi),在機(jī)體內(nèi)參與葡萄糖代謝,在糖酵解,糖異生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代謝中都發(fā)揮著重要作用。
測(cè)定原理
磷酸丙糖異構(gòu)酶將磷酸二羥丙酮轉(zhuǎn)化為3-磷酸甘油醛,3-磷酸甘油醛與NAD在3-磷酸甘油醛脫氫酶的作用下生成3-磷酸甘油酸和NADH,340nm處的吸光度變化反映了磷酸丙糖異構(gòu)酶的活性的高低。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
人 RETSAT 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 CELA2A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 PRH1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 ESRP1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 TMPRSS12 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 AGA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 EMB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 ZPBP2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 RNF144B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 KCNMB3 轉(zhuǎn)錄變體3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
磷酸丙糖異構(gòu)酶測(cè)試盒50管/48樣人妊娠特異性β1糖蛋白4(PSG4)免疫試劑盒*直銷
人妊娠特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
人妊娠皰疹抗體(HG)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
人熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
人熱休克蛋白90kDaβ(GRP94),成員1(HSP90B1)免疫試劑盒*直銷
人熱休克蛋白75 kDa,線粒體(TRAP1/HSP75)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
人熱休克蛋白72(HSP-72)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
人熱休克蛋白70(HSP-70)抗體免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
人熱休克蛋白22(HSP-22)免疫試劑盒*直銷
人熱穩(wěn)定抗原(HSA/CD24)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
人缺血修飾白蛋白(IMA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
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