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貨號	BJ-X97460

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

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產(chǎn)品名稱	大鼠脂肪干細(xì)胞
規(guī)格	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號	BJ-X97460

商品屬性：

名稱 大鼠脂肪干細(xì)胞

2.組織來源：脂肪組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠脂肪干細(xì)胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成，聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪干細(xì)胞（ADSCs）是一種具有多向分化潛能的干細(xì)胞，主要恢復(fù)組織細(xì)胞的修復(fù)功能，促進(jìn)細(xì)胞的再生，恢復(fù)年輕面容的同時(shí)，身體機(jī)能也得到充分改善，有效改善亞健康、早衰等疾病，由內(nèi)而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細(xì)胞具有很多優(yōu)點(diǎn)：①具有自我更新及多向分化的潛能；②來源充足；③對供區(qū)的創(chuàng)傷較小；④獲得率及體外擴(kuò)增速率高。脂肪干細(xì)胞是目前被廣泛應(yīng)用于組織工程領(lǐng)域中理想的種子細(xì)胞。

5.方法簡介：

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脂肪干細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脂肪干細(xì)胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-R147

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

圖片13.jpg

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人α1抗胰蛋白(α1-AT)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

改良EC（mEC+n）肉湯英文名稱：Modified EC Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10ml*20支/包

霉菌培養(yǎng)基（含瓊脂和氯）英文名稱：Fungal Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g

指示選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ) 英文名稱：Direct selective medium-based 產(chǎn)品規(guī)格：250g

豬膽囊收縮素/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

小鼠化蛋白激C(P-PKC)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

小鼠25羥基(25-OHC)免ows\system32\EhStorShell.dll

大鼠脂肪干細(xì)胞Dermatophilus congolensis剛果嗜皮探針法熒光定量PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周Phospho-NMDAR2B (Tyr1336) 磷酸化谷受體2B抗體規(guī)格: 0.1mlRhoA RhoA抗體規(guī)格: 0.1ml

Radix cynanchi atrati白薇LAMP鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-4周CCDC18 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白18抗體規(guī)格: 0.2mlPLTP 磷脂轉(zhuǎn)移蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

Bovine Rotavirus Group B(BRAV-B)牛輪狀病毒B組RT-LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周DAAM1 形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體規(guī)格: 0.1mlKappa Light Chain k輕鏈抗體規(guī)格: 0.1ml

Kumlinge Virus Kumlinge病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周hemagglutinin protein/H 麻疹毒凝素抗體 0.2mlphospho-RPS6KA1(Thr359) 磷酸化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Virus(HFRSV)腎綜合癥出血熱病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周GP65/SDFR1/NPTN 間質(zhì)細(xì)胞衍化因子受體1抗體規(guī)格: 0.1mlUSP3 去泛素化3抗體 0.2ml

Trichodysplasia Spinulosa Associated Polyomavirus(TSPyV) TS多瘤病毒PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周DNA Ligase 1 DNA連接1抗體規(guī)格: 0.1mlMrpL28 線粒體核糖體蛋白L28抗體規(guī)格: 0.1ml

Borrelia garinii伽氏疏螺旋體（伽氏包柔螺旋體）LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周phospho-MAPK11(Thr180+Tyr182) 磷酸化絲裂原活化的蛋白激p38β抗體規(guī)格: 0.1mlphospho-EGFR (Ser695) 磷酸化表皮生因子受體抗體規(guī)格: 0.1ml

Xanthomonas populi楊樹細(xì)性潰瘍病PCR試劑盒植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周Rabbit Anti-human IgM/AP 堿性磷酸（AP）標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-rat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Polyporus豬苓PCR鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-4周ALDH2/ALDHI 乙醛脫2抗體規(guī)格: 0.2mlPHD3 脯羥化抗體規(guī)格: 0.2ml

Staphylococcus spp.葡萄球?qū)偻ㄓ肔AMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負(fù)20度一年 2-3周DPY19L2 DPY19L2蛋白抗體規(guī)格: 0.2mllaminin 層粘連蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml