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產(chǎn)地	國(guó)產(chǎn)	加工定制	否
適用領(lǐng)域	科研	貨號(hào)	BJ-P6733

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱	英文名稱	規(guī)格	貨號(hào)
腺熱埃里希體PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒	Erlichia sennetsuPCR	多種規(guī)格	BJ-P6733

特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

儲(chǔ)存條件：-20℃以下，有效期12個(gè)月。

PCR檢測(cè)試劑盒 (2).jpg

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer 5μl

dNTP mixl 4μl

引物1（10pM） 2μl

引物2（10PM） 2μl

Taq酶（2U/μl） 1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

三、注意事項(xiàng)

１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。

２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。

３．所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。

４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。

操作流程

1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。

3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。

4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。

6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

7. 儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。

9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。

125mL RNase-Free TE Buffer（無(wú)RNase的TE緩沖液）,20X，pH7.6 RNase-Free TE Buffer,20X，pH7.6 常溫保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Multidrug resistance-associated protein 9

1 管 BL21(DE3)plysS大腸桿菌 BL21(DE3)plysS E.coli Strain -80℃保存營(yíng)養(yǎng)瓊脂（NA）進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Nutrient Agar細(xì)菌總數(shù)測(cè)定，細(xì)菌傳代培養(yǎng)250

50T 轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因PCR檢測(cè)試劑盒低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人類(lèi)白組織相容性抗原α鏈G(HLA-G)ELISA試劑盒

500mL Phosphate Buffer，0.2M, pH7.4 Phosphate Buffer，0.2M, pH7.4 常溫保存 0.156-10 ng/mL 人骨膜蛋白(POSTN)ELISA試劑盒

500mL Standard Ringer’s Solution (un-buffered) Standard Ringer’s Solution (un-buffered) 常溫保存 0.39-25 ng/mL ELISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 9

500U Benzonase核酸 Benzonase Nuclease -20℃保存Fraser培養(yǎng)基進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Fraser Medium250克李氏菌的

2 ug pJRD215 pJRD215 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 78-5000 pg/mL 人散亂蛋白1 human Dishevelled-1ELISA試劑盒

100mL RNase-Free Sodium Acetate Solution（無(wú)RNase的乙酸鈉溶液）,3M，pH5.2 RNase-Free Sodium Acetate Solution,3M，pH5.2 常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Tryptophan 5-hydroxylase 2

250mL TE Buffer,pH7.6 TE Buffer,pH7.6 常溫保存 0.312-20 ng/mL 人Ras相關(guān)蛋白(RAB19) ELISA試劑盒

250mL 固相RNase清除劑 Surface RNase Erasol 常溫 0.625-40 ng/mL 人補(bǔ)體7(C7)ELISA試劑盒

20000U S1核酸 S1 Nuclease -20℃保存改良Frey氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Frey Medium Modified Base250克培養(yǎng)滑液支原體及其他禽支原體用

腺熱埃里希體PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒山茱萸新苷標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C34H50O20英文名：Cornuside分子量：542.49 號(hào)：131189-57-6檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥95%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

商陸皂苷甲標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C42H66O16英文名：esculentosideA分子量：826.96號(hào)：65497-07-6檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

商陸皂苷元標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C31H48O7英文名：Phytolaccagenin分子量：532.71號(hào)：1802-12-6檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

芍藥苷標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C23H28O11英文名： Paeoniflorin分子量：480.46號(hào)：23180-57-6檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

芍藥內(nèi)酯苷標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C23H28O11英文名： Alibiflorin分子量： 480.46號(hào)： 39011-90-0檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

蛇床子素標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C15H16O3英文名： Osthole分子量： 244.29號(hào)： 484-12-8檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

射干苷標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C22H22O11英文名： Tectoridin分子量： 462.40號(hào)： 611-40-5檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

麝香酮標(biāo)準(zhǔn)品分子式： C16H30O英文名： Muscone分子量： 238.41號(hào)： 541-91-3檢測(cè)方式：氣相色譜法GC≥98%規(guī)格：0.15ml (可根據(jù)客戶需求包裝)

升麻素標(biāo)準(zhǔn)品分子式：C16H18O6英文名：Cimifugin分子量：306.32號(hào)：37921-38-3檢測(cè)方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)