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產(chǎn)地 | 國(guó)產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 | 貨號(hào) | BJ-P6731 |
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
馬輪狀病毒PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒 | Equine RotavirusRTPCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6731 |
特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲(chǔ)存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 | 三、注意事項(xiàng) 1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專(zhuān)用的PCR實(shí)驗(yàn)室。 2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。 3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。 4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線(xiàn)殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
支原體肉湯培養(yǎng)基 Arginine Mycoplasma Broth Meium 250g 15.6-1000 pg/mL 人巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒
2 ug pYr-1.3-hH1-EGFP pYr-1.3-hH1-EGFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Asymmetric dimethylarginine
1mL 超快轉(zhuǎn)染試劑盒 Rapid Transfection Reagent 2-8℃保存厭氧肉肝湯進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Anaerobic Beef Liver Broth250克供一般厭氧菌培養(yǎng)及其制備檢驗(yàn)用
1瓶 MOLT-4株 MOLT-4 低溫運(yùn)輸和保存
MUG營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA-MUG培養(yǎng)基) 250g
1瓶 NCI-H460株 NCI-H460 低溫運(yùn)輸和保存 0.625-40 ng/mL 不對(duì)稱(chēng)二甲基(Asymmetric dimethylarginine)ELISA試劑盒
40%尿素水 40%Urea Water 5ml/支*10 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Disabled homolog 1
5g 1:3000 Pepsin 1:3000 4℃保存
2 ug pCDF1-MCS2-EF1-copGFP pCDF1-MCS2-EF1-copGFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ubiquitin-conjugating enzyme E2 A
100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.0 常溫 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Gamma-glutamyltranspeptidase 1
1瓶 CHO-K1株 CHO-K1 低溫運(yùn)輸和保存 7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human VIP peptides
馬輪狀病毒PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒三葉豆紫檀苷標(biāo)準(zhǔn)品分子式: C22H22O10英文名: Trifolirhizin分子量:446.41號(hào):6807-83-6檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)
桑黃素標(biāo)準(zhǔn)品分子式: C15H10O7英文名: Morin分子量:302.24號(hào):480-16-0檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)
桑色素標(biāo)準(zhǔn)品分子式: C15H10O7.xH2O英文名: Morin hydrate分子量:302.24號(hào):654055-01-3檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)
沙苑子苷A標(biāo)準(zhǔn)品分子式: C28H32O16英文名: Complanatoside A分子量: 624號(hào): 146501-37-3檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)
山麥冬皂苷B標(biāo)準(zhǔn)品分子式:C39H62O12 英文名:Liriopesides B分子量:722.90號(hào):檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)
山柰酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷標(biāo)準(zhǔn)品分子式:C27H30O15英文名:Kaempeerol-3-Oglucorhamnoside分子量:594.52號(hào):40437-72-7檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)
山楂酸標(biāo)準(zhǔn)品分子式:C30H48O4英文名:Maslinic acid分子量:472.71號(hào):4373-41-5檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)
山梔苷甲酯標(biāo)準(zhǔn)品分子式:C17H26O11英文名:Dipsacoside B分子量:406.38號(hào):64421-28-9檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格:20mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)
山梔子苷B標(biāo)準(zhǔn)品分子式: C17H24O11英文名: Gardenoside分子量: 404.37號(hào): 24512-62-7檢測(cè)方式:高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格:10mg 20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶(hù)需求包裝)
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