馬輪狀病毒PCR熒光定量檢測試劑盒-上海邦景實業(yè)有限公司

產(chǎn)地	國產(chǎn)	加工定制	否
適用領(lǐng)域	科研	貨號	BJ-P6731

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱	英文名稱	規(guī)格	貨號
馬輪狀病毒PCR熒光定量檢測試劑盒	Equine RotavirusRTPCR	多種規(guī)格	BJ-P6731

特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

儲存條件：-20℃以下，有效期12個月。

PCR檢測試劑盒 (2).jpg

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer 5μl

dNTP mixl 4μl

引物1（10pM） 2μl

引物2（10PM） 2μl

Taq酶（2U/μl） 1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

三、注意事項

１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。

２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。

３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。

操作流程

1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。

4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。

6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。

7. 儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。

9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

支原體肉湯培養(yǎng)基 Arginine Mycoplasma Broth Meium 250g 15.6-1000 pg/mL 人巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒

2 ug pYr-1.3-hH1-EGFP pYr-1.3-hH1-EGFP 低溫運輸，-20℃保存 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Asymmetric dimethylarginine

1mL 超快轉(zhuǎn)染試劑盒 Rapid Transfection Reagent 2-8℃保存厭氧肉肝湯進口、國產(chǎn)Anaerobic Beef Liver Broth250克供一般厭氧菌培養(yǎng)及其制備檢驗用

1瓶 MOLT-4株 MOLT-4 低溫運輸和保存

MUG營養(yǎng)瓊脂（NA-MUG培養(yǎng)基） 250g

1瓶 NCI-H460株 NCI-H460 低溫運輸和保存 0.625-40 ng/mL 不對稱二甲基（Asymmetric dimethylarginine）ELISA試劑盒

40%尿素水 40%Urea Water 5ml/支*10 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Disabled homolog 1

5g 1:3000 Pepsin 1:3000 4℃保存

2 ug pCDF1-MCS2-EF1-copGFP pCDF1-MCS2-EF1-copGFP 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ubiquitin-conjugating enzyme E2 A

100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.0 常溫 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Gamma-glutamyltranspeptidase 1

1瓶 CHO-K1株 CHO-K1 低溫運輸和保存 7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human VIP peptides

馬輪狀病毒PCR熒光定量檢測試劑盒三葉豆紫檀苷標準品分子式： C22H22O10英文名： Trifolirhizin分子量：446.41號：6807-83-6檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

桑黃素標準品分子式： C15H10O7英文名： Morin分子量：302.24號：480-16-0檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

桑色素標準品分子式： C15H10O7.xH2O英文名： Morin hydrate分子量：302.24號：654055-01-3檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

沙苑子苷A標準品分子式： C28H32O16英文名： Complanatoside A分子量： 624號： 146501-37-3檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

山麥冬皂苷B標準品分子式：C39H62O12 英文名：Liriopesides B分子量：722.90號：檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

山柰酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷標準品分子式：C27H30O15英文名：Kaempeerol-3-Oglucorhamnoside分子量：594.52號：40437-72-7檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

山楂酸標準品分子式：C30H48O4英文名：Maslinic acid分子量：472.71號：4373-41-5檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

山梔苷甲酯標準品分子式：C17H26O11英文名：Dipsacoside B分子量：406.38號：64421-28-9檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：20mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)

山梔子苷B標準品分子式： C17H24O11英文名： Gardenoside分子量： 404.37號： 24512-62-7檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規(guī)格：10mg 20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)