當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>> 腸球菌通用PCR熒光定量檢測試劑盒
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
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適用領域 | 科研 | 貨號 | BJ-P6705 |
操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
腸球菌通用PCR熒光定量檢測試劑盒 | Enterococcus spp.PCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6705 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。 2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。 3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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200 mL 人內(nèi)皮分離液1.060 Cell Separation Solution -20℃保存TBB培養(yǎng)基進口、國產(chǎn)Tybobutyricum Broth Base250克乳酪產(chǎn)品中梭菌的計數(shù)
10mg 中性親和素蛋白 Nuetral Avidin -20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Hyaluronidase-2
250mL Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH3.0 Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH3.0 常溫保存MH肉湯進口、國產(chǎn)MHB250克用于抗菌素藥物敏感性試驗
250mL HEPES Buffer,1M,pH7.0 HEPES Buffer,1M,pH7.0 常溫保存
木糖發(fā)酵管 20支 15.6-1000 pg/mL 人透明質(zhì)酸介導運動因子受體(HMMR)ELISA試劑盒
50T 中華鱘特定基因序列PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 15.6-1000 pg/mL 登革熱病毒Ⅰ型(DFV-Ⅰ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
250mL PBlec Washing Solution in PBS,pH7.0,2X PBlec Washing Solution in PBS,pH7.0,2X 常溫保存NZYM肉湯進口、國產(chǎn)NZYM Broth100克BR
500mL Sodium Phosphate Buffer(鈉緩沖液),0.2M,pH8.0 Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH8.0 常溫保存 15.6-1000 pg/ml 人低親和力免疫球蛋白Fc區(qū)Ⅲ受體γ(FCG3A)ELISA試劑盒
1瓶 TT株 TT 低溫運輸和保存 0.31-20.0 ng/mL 人腫瘤壞死因子受體超家族成員10B(TNFRSF10B)ELISA試劑盒
1瓶 TM3株 TM3 低溫運輸和保存 0.156-10 ng/mL 人前膠原C內(nèi)肽增強子1(PCPE1)ELISA試劑盒
2 ug pOTB7 PPP2R5D pOTB7 PPP2R5D 低溫運輸,-20℃保存 0.47-30 ng/mL 人質(zhì)子肌醇轉(zhuǎn)運蛋白ELISA試劑盒
腸球菌通用PCR熒光定量檢測試劑盒黃腐酚標準品分子式:C21H22O5 英文名:Xanthohumol 分子量:354.4 號:6754-58-1 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
黃華堿標準品分子式: C15H20N2O 英文名:Thermopsine 分子量:244.3321 號:486-90-8 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
黃連堿標準品分子式:C19H14ClNO4 英文名:Coptisine chloride 分子量:355.77 號:6020-18-4 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
硫酸黃連堿標準品分子式:C19H14NO4+ 英文名:Coptisine 分子量:320.32 號:3486-66-6 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
黃芪甲苷標準品分子式:C41H68O14 英文名:Astragaloside IV 分子量:784.97 號:84687-43-4 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
黃芪皂苷I標準品分子式: C45H72O16 英文名: Astragaloside I 分子量: 869.04 號: 84680-75-1 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格: 10mg 20mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
黃芪皂苷II標準品分子式: C43H70O15 英文名: Astragaloside II 分子量: 827.01 號: 84676-89-1 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格: 10mg 20mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
黃芪皂苷Ⅲ標準品分子式: C41H68O14 英文名: Astragaloside III 分子量: 784.97 號: 84687-42-3 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
黃芪總皂苷標準品分子式:C28H32O17 英文名:Astragaloside 分子量:640.55 號:17429-69-5 檢測方式:紫外分光光度法UV≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
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