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ELISA試劑盒試驗(yàn)條件的選擇
在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)試驗(yàn)條件的選擇是很首要的，其間包括:
有條件者應(yīng)運(yùn)用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是如今較為滿意的供氫體。
底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)參與強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以中止反應(yīng)。
通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。
底物運(yùn)用液有必要新鮮制造，尤其是H2O2在臨用前參與。
然后再固定其它條件或采納“方陣法”（包被物、待檢樣品的參看品及酶符號(hào)抗體分別為不一樣的稀釋度）在正式試驗(yàn)系統(tǒng)里地滴定其工作濃度。
有時(shí)本底較高，說(shuō)明有非特異性反應(yīng)，可選用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇懇求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。
蛋白質(zhì)包被的*適濃度需進(jìn)行滴定：即用不一樣的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相一起，查詢陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。
選擇OD值而蛋白量*少的濃度。關(guān)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1～10μg/ml。