人胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒洗滌方式及注意事項(xiàng)

 人胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒國(guó)產(chǎn)進(jìn)口現(xiàn)貨中的洗滌

洗滌是ELISA實(shí)驗(yàn)中是多次數(shù)的操作，也是非常重要的步驟。不嚴(yán)格的洗滌容易出現(xiàn)洗不干凈或交叉污染現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)重復(fù)效果差的現(xiàn)象。不管用多道加樣器、洗瓶、吸管，還是洗板機(jī)，嚴(yán)格按照說明書操作不要減少步驟洗滌的洗滌體積、洗滌時(shí)間和洗滌次數(shù)。注意標(biāo)準(zhǔn)化操作將減少實(shí)驗(yàn)誤差和不同實(shí)驗(yàn)之間的誤差。操作者常出現(xiàn)洗板不干凈現(xiàn)象，請(qǐng)比照操作：

a)洗液不要溢出孔外，以免污染相鄰的孔，特別是每次洗板的前兩遍，若高濃度的孔污染了低濃度的孔或空白孔，其造成的交叉污染的孔是洗不掉的，背景肯定會(huì)增高。

b)特別注意：設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候要考慮實(shí)驗(yàn)孔的位置，保證甩掉洗液時(shí)，空白孔、低濃度孔或陰性對(duì)照組在上面或一側(cè)或分開。同時(shí)注意甩掉洗液的動(dòng)作翻轉(zhuǎn)(從正上方旋轉(zhuǎn)120-150度)要迅速、干脆。甩板不要手腕左右搖擺、旋轉(zhuǎn)來甩液體!甩出后以直線方式補(bǔ)2-3次甩出液體。

c)用干凈的濾紙，不要用衛(wèi)生紙，因?yàn)榧?xì)小粉塵或者碎屑容易吸附到孔底，導(dǎo)致洗板不干凈，結(jié)果偏高或偏低，重復(fù)孔的數(shù)值也會(huì)相差很大。

d)每次拍板不要重復(fù)在一個(gè)地方拍，特別是洗去酶的步驟;拍板不宜過輕，否則拍不干凈，拍板很用力不會(huì)對(duì)蛋白有什么影響。但注意不要太重，以至把板條給拍斷。每次洗板后輕叩幾下，后一次一定要扣干凈。

e)不能減少洗液體積、洗板時(shí)間和次數(shù)。洗板時(shí)間太短，洗板效果不佳。延長(zhǎng)洗板時(shí)間和增加洗板次數(shù)可以使背景更干凈。

檢測(cè)范圍和保存條件及有效期

1.試劑盒保存：2-8℃

2.有效期：6個(gè)月

計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

人胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒國(guó)產(chǎn)進(jìn)口現(xiàn)貨操作注意事項(xiàng)：

1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。

3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4)使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

7)底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

8)實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

9)不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

10)加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

11)按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

檢測(cè)范圍：1ng/L -30ng/L