elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)方法和步驟

1．實(shí)驗(yàn)方法

我們采用的是水平乙酸纖維薄膜電泳法即用普通濾紙做鹽橋，在低溫常壓下的電泳。

2．實(shí)驗(yàn)步驟

(1)把電泳緩沖液加入電泳槽內(nèi)到紅線位置，鹽橋?yàn)V紙對(duì)折后用訂書(shū)機(jī)將其同定在橋架上，然后加蓋置于4℃冰箱或相應(yīng)冷室里預(yù)冷。

(2)從低溫(-20℃)冰箱中取出樣品，于室溫下自然解凍，并同時(shí)將乙酸纖維薄膜裁成適當(dāng)大小投入緩沖液中浸泡濕透。

(3)從緩沖液中取出乙酸纖維薄膜夾于兩張普通濾紙間，用手輕壓濾紙，以吸去薄膜上的多余緩沖液。

(4)樣品解凍后，用彎頭滴管吸取少量樣品液于點(diǎn)樣板上的小方格內(nèi)，并依序記下樣品號(hào)碼，再用點(diǎn)樣刷蘸取適量樣品液點(diǎn)在乙酸纖維薄膜粗糙面距邊緣1.5cm處，之后迅速轉(zhuǎn)入電泳槽內(nèi)，按規(guī)定方向(緩沖液pH值大于5.6的，樣品的電泳方向是由負(fù)極向正極泳動(dòng)，若pH值小于或等于5.6則由正極向負(fù)極泳動(dòng))把點(diǎn)上樣的薄膜水平搭在鹽橋上，待調(diào)整好位置后加蓋飽和1～2min，接通電泳，選擇適當(dāng)電壓和電流并按規(guī)定時(shí)間電泳。

(5)時(shí)間到后立即將電壓電流選擇調(diào)零和關(guān)掉電源，依次取出走完的乙酸纖維薄膜，放入相應(yīng)的染色液中，染色5min后取出于5％乙酸溶液脫色1～2h，或直到電泳帶背影*清楚為止，自然風(fēng)干后，照相或透明等處理，易于長(zhǎng)期保存。