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大鼠elisa檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法的詳細(xì)解說

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大鼠elisa檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法的詳細(xì)解說
1. 抗體的酶標(biāo)記及質(zhì)量鑒定
   試劑盒收集峰即為酶標(biāo)抗體峰。標(biāo)記完后用紫外分光光度計(jì)在分別在280nm、及403nm處測(cè)定酶標(biāo)記物的A值,計(jì)算免疫球蛋白量、摩爾比值、酶結(jié)合率以及標(biāo)記率。
2. 包被用緩沖液及*適包被抗原濃度的優(yōu)化
   ① 包被緩沖液的優(yōu)化:三種緩沖液作為包被液,抗原包被濃度為5ug/ml,及2.5ug/ml,酶標(biāo)抗體工作濃度為1:400及1:300,用自動(dòng)酶標(biāo)儀分析,選擇*佳的包被緩沖液系統(tǒng)。
   ② *適抗原包被濃度的優(yōu)化:顯色的強(qiáng)度在一定范圍內(nèi)與包被的抗原量成正比,但隨著包被抗原濃度的增加,顯色的強(qiáng)度反而降低,我們選擇臨界包被值作為包被抗原量。
3. 封閉液、洗滌液及保護(hù)液的優(yōu)化
   ① 封閉液的優(yōu)化:采用文獻(xiàn)報(bào)道的方法進(jìn)行封閉,其封閉液的組成為:10mM磷酸鹽緩沖液含1%的牛血清白蛋白。
   ② 洗滌液的配制:采用文獻(xiàn)報(bào)道的方法配制洗滌液。
4. 酶標(biāo)板保護(hù)液的優(yōu)化
    在封閉完后加入保護(hù)液于4℃冰箱中孵育放置一個(gè)晚上,同時(shí)與未做保護(hù)的酶標(biāo)板進(jìn)行對(duì)照,然后將保護(hù)的及未保護(hù)的酶標(biāo)板置于37烘箱中放置15天,考察保護(hù)液對(duì)酶標(biāo)板的穩(wěn)定性的影響。
5. 酶標(biāo)抗體稀釋度、保護(hù)液的優(yōu)化
   ① 稀釋度的優(yōu)化:抗原包被濃度為4ug/ml,經(jīng)孵育、洗滌后、顯色終止后,用自動(dòng)酶標(biāo)儀分析,選擇A值為1.5左右的酶標(biāo)抗體稀釋度為*適工作濃度。
   ② 保護(hù)液的優(yōu)化:適當(dāng)?shù)木彌_液以及添加無關(guān)蛋白質(zhì)、糖、防腐劑以及一些含氨基的化合物等都會(huì)對(duì)對(duì)酶標(biāo)抗體的活性起一定的保護(hù)作用,因此我們?cè)O(shè)計(jì)了一組保護(hù)劑用于保護(hù)酶標(biāo)抗體,與未添加任何糖蛋白的酶標(biāo)抗體做對(duì)照,
大鼠elisa檢測(cè)試劑盒高糖基化絨毛膜促性腺激素(hCG)ELISA試劑盒 ,英文名: hCG ELISA Kit

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干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)ELISA試劑盒 ,英文名: IRF3 ELISA Kit

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