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科研凍存細胞收集處理過程

時間:2024/7/15閱讀:140
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科研凍存細胞收集處理過程:

1、收到快遞后,若發(fā)現(xiàn)凍存管破損、箱內(nèi)已無干冰,請拍照后及時聯(lián)系供貨商。

2、收到細胞后請盡快復蘇,給凍存管(外觀×1張)拍照留存,隔天在倒置顯微鏡下確認細胞狀態(tài),給細胞(100倍×2張,200倍×2張)拍照,售后時需提供。

3、復蘇細胞時不可直接將凍存管丟進水浴鍋,用鑷子夾住凍存管頂部,將凍存管下部浸入水中即可,由于水浴鍋處于實驗室暴露、高溫、濕潤環(huán)境,極易滋生各種微生物,建議在水浴鍋中加入Deeming水浴鍋安全衛(wèi)士抑制各類微生物的滋生,大程度上防止水浴鍋中的微生物對凍存細胞造成的污染。

4、在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作,凍存管、試劑、耗材拿進去之前一定要用75%酒精消毒,培養(yǎng)試劑盡量不要共用,若有共用試劑,建議配成完培后整體過濾除菌。

5、原代細胞傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 ,保種1支,另外1支傳代至T25新瓶,前面代次建議代代保種,以妨出現(xiàn)問題后無種可用,原代細胞需根據(jù)生長狀況判斷傳代比例。

6、第一次傳代時需要摸索消化時間,建議每隔30s就觀察一次,并記錄消化時間,細胞會隨著后期傳代次數(shù)的增多而延長消化時間。

7、由于細胞在運輸過程中失去原有適宜的生長條件且長時間顛簸,收到細胞進行復蘇后,前1-2代培養(yǎng)可適當提高血清含量以促進恢復細胞原有狀態(tài)并縮短到達對數(shù)期的時間。

8、原代細胞建議選用廠家供應的專用培養(yǎng)基,否則可能會因為改變培養(yǎng)條件,大大縮短細胞的培養(yǎng)代數(shù),造成種子細胞的浪費。

9、及時更換和補充培養(yǎng)箱水盤內(nèi)的水,建議加入Deeming細胞培養(yǎng)箱水盤安全衛(wèi)士進行污染物的預防。

10、 購買的細胞只可用于科研,不得應用于人體。


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