細胞是生物體形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動的基本單位。通常認為細胞是人體的最小單位,它是由許多更小的具有自身功能的結(jié)構(gòu)組成。盡管人類細胞大小不等,但所有的細胞均很小。即使是最大的細胞如受精卵,也是肉眼所不能見到的。
細胞狀態(tài)不好可能原因:
一、細胞本身的狀態(tài)
1. 細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;
2. 細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;
3. 細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;
4. 1酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未全分離而成團,細胞死亡;
5. 細胞的凍存與復蘇:慢凍速溶。
二、污染
1. 支原體污染;
2. 霉菌污染;
3.血清中有黑膠蟲。
三、培養(yǎng)基或血清
1. 更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;
2. 選擇的培養(yǎng)基是否合適;
3. 培養(yǎng)基配制是否合適;
4. 培養(yǎng)基配制是否準確無誤。
四、培養(yǎng)環(huán)境
1. CO2供應(yīng)是否正常;
2. 培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確。
針對性上面原因的解決方案:
1.注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù),接種量等;
2.避免產(chǎn)生污染(用正規(guī),合法,可朔源的血清);
3.更換好一點的血清;
4.要用合適的血清或培養(yǎng)基,最好經(jīng)過驗證;
5.用無菌的PBS洗幾次,可一定程度上緩解。注意好實驗環(huán)境要,保持細胞間整個環(huán)境的潔凈度。
6.換用進口的一次性塑料培養(yǎng)瓶。
7.建議清理無菌室所有物品,重新滅菌,用KMnO4熏蒸,按使用無菌室做,細胞重新復蘇。
8.在換液前先加入生理鹽水并輕輕拍打,沖洗干凈后再加入培養(yǎng)液,堅持天天洗,傳代時加生理鹽水再離心一次,接種密度稍大一些,一段時間后,蟲子就會大大減少,對細胞的生長也不會有大的影響。
9.注意實驗室的環(huán)境。
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