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細(xì)胞狀態(tài)不好原因及解決方案

時(shí)間:2023/11/6閱讀:585
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       細(xì)胞是生物體形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動(dòng)的基本單位。通常認(rèn)為細(xì)胞是人體的最小單位,它是由許多更小的具有自身功能的結(jié)構(gòu)組成。盡管人類細(xì)胞大小不等,但所有的細(xì)胞均很小。即使是最大的細(xì)胞如受精卵,也是肉眼所不能見(jiàn)到的。

細(xì)胞狀態(tài)不好可能原因:

一、細(xì)胞本身的狀態(tài)

1. 細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;

2. 細(xì)胞的接種量:接種量過(guò)低,細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;

3. 細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng);

4. 1酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短:時(shí)間過(guò)長(zhǎng),細(xì)胞死亡;時(shí)間過(guò)短,細(xì)胞未全分離而成團(tuán),細(xì)胞死亡;

5. 細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速溶。

二、污染

1. 支原體污染;

2. 霉菌污染;

3.血清中有黑膠蟲(chóng)。

三、培養(yǎng)基或血清

1. 更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證;

2. 選擇的培養(yǎng)基是否合適;

3. 培養(yǎng)基配制是否合適;

4. 培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤。

四、培養(yǎng)環(huán)境

1. CO2供應(yīng)是否正常;

2. 培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確。


針對(duì)性上面原因的解決方案:

1.注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù),接種量等;

2.避免產(chǎn)生污染(用正規(guī),合法,可朔源的血清);

3.更換好一點(diǎn)的血清;

4.要用合適的血清或培養(yǎng)基,最好經(jīng)過(guò)驗(yàn)證;

5.用無(wú)菌的PBS洗幾次,可一定程度上緩解。注意好實(shí)驗(yàn)環(huán)境要,保持細(xì)胞間整個(gè)環(huán)境的潔凈度。

6.換用進(jìn)口的一次性塑料培養(yǎng)瓶。

7.建議清理無(wú)菌室所有物品,重新滅菌,用KMnO4熏蒸,按使用無(wú)菌室做,細(xì)胞重新復(fù)蘇。

8.在換液前先加入生理鹽水并輕輕拍打,沖洗干凈后再加入培養(yǎng)液,堅(jiān)持天天洗,傳代時(shí)加生理鹽水再離心一次,接種密度稍大一些,一段時(shí)間后,蟲(chóng)子就會(huì)大大減少,對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)也不會(huì)有大的影響。

9.注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境。




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