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熒光素標記抗體鑒定:
1、抗體的效價鑒定:鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2、抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
3、真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
熒光素標記抗體應用范圍:
1.用于細菌、病毒、梅毒螺旋體、鉤端螺旋體等微生物的抗原或抗體檢查。
2.用于臨床自身免疫病的多種自身抗體熒光檢查,如抗核抗體,抗心肌抗體等。
3.細胞因子等檢查的熒光流式細胞儀測定。
4.白細胞分型抗原的免疫熒光染色。
5.免疫組織及免疫病理中抗原,抗體檢查,如各種腫瘤抗原檢查。
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