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在常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)刂?,有很多不?dāng)操作情況下都會(huì)影響抗原—抗體反響的,以elisa試劑盒為例,為您解析:
抗原—抗體結(jié)合進(jìn)程可分為兩個(gè)階段:一階段為特異性結(jié)合階段,此階段反響迅速,在數(shù)秒鐘至數(shù)分鐘內(nèi)完成,但無(wú)可見(jiàn)反響;第二階段為可見(jiàn)反響階段,歷時(shí)數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí),此階段易受以下要素的影響。
一、電解質(zhì)
抗原和抗體別離有對(duì)應(yīng)的極性基團(tuán),能彼此吸附并由親水性變?yōu)槭杷?。電解質(zhì)的存在可使抗原—抗體復(fù)合物失掉電荷而凝聚,呈現(xiàn)可見(jiàn)反響。故免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中多采用生理鹽水稀釋抗原或抗體。
二、酸堿度
抗原—抗體反響zui適pH值規(guī)模是6—8。超出此規(guī)??捎绊懣乖?、抗體的理化性狀,呈現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性。
三、溫度
適當(dāng)?shù)臏囟瓤稍黾涌乖c抗體分子磕碰的時(shí)機(jī),加快二者結(jié)合的速度。抗體抗原反響的zui適溫度為37℃。
此外,適當(dāng)振蕩或拌和也可促進(jìn)抗原—抗體分子的接觸,提高結(jié)合速度。
根據(jù)抗原的性質(zhì)、結(jié)合反響的現(xiàn)象、參加反響的成分要素,可將抗原—抗體反響分為凝集反響、沉淀反響、補(bǔ)體參加的反響、采用符號(hào)物的抗原—抗體反響等。近年來(lái)隨著免疫化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的開(kāi)展,以及各種現(xiàn)代技能在免疫學(xué)中的使用,使免疫學(xué)技能建立了許多微量、快速、特異、靈敏并能進(jìn)行自動(dòng)化檢測(cè)和數(shù)據(jù)分析處理的新方法。
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