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動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中血清起到的作用有如下幾點(diǎn):
1.提供細(xì)胞生存和增殖所必需的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因子。
2.補(bǔ)充基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量不足的營(yíng)養(yǎng)成分。
3.含有一些可供貼壁細(xì)胞型細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的基質(zhì)成分。
4.提供載體蛋白,可結(jié)合維生素、脂質(zhì)、金屬離子等。
5.在一些情況下,中和毒性物質(zhì)保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
6.給培養(yǎng)液提供良好的緩沖系統(tǒng)。
7.提供蛋白酶抑制劑,保護(hù)細(xì)胞免受死細(xì)胞釋放的蛋白酶的傷害。
但是血清也存在一些弊端,比如存在不少有害成分(補(bǔ)體、免疫球蛋白和一些生長(zhǎng)抑制因子等);血清成分不明確,影響對(duì)結(jié)果的分析;不同動(dòng)物、不同批次的血清成分和活性有很大不同,使得培養(yǎng)結(jié)果不穩(wěn)定。
盡管如此,血清仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不良時(shí),常常會(huì)先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛后再換成無(wú)血清培養(yǎng)液。
血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,其中有些氨基酸動(dòng)物細(xì)胞本身不能合成(稱為必需氨基酸),必須由培養(yǎng)液提供。血清激素有胰島素、生長(zhǎng)激素等及多種生長(zhǎng)因子(如表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、類胰島素生長(zhǎng)因子等);血清還含有多種未知的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子及其他活性物質(zhì),能促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和貼附。因此,細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),要保證細(xì)胞能夠順利生長(zhǎng)和增殖,一般需添加10%~20%的血清,動(dòng)物血清還可起到酸堿度緩沖液的作用.
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