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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>影響ELISA試劑盒曲線問題的原因有哪些?
標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會(huì)直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。我司技術(shù)人員在處理售后的問題中,有不少科研朋友咨詢曲線的問題,隨后我司技術(shù)人員將影響ELISA試劑盒曲線問題的原因做了如下總結(jié):
一、OD值不正常的可能原因是:
1、試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃;
2、溫度控制不好,控制正確溫度;
3、孵育時(shí)間不準(zhǔn)確,控制孵育時(shí)間;
4、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增 加,洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干;
5、陽(yáng)光直射,對(duì)著風(fēng)直接吹,避風(fēng)避;
6、酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)錯(cuò)誤,酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)450nm;
7、抗體的稀釋錯(cuò)誤,正確的稀釋抗體;
8、水質(zhì)問題,用娃哈哈礦泉水代替。
二、白板的可能原因是:
1、洗滌液配制錯(cuò)誤,正確的配制洗滌液;
2、少加液體(錯(cuò)加液體),正確的步驟加液體。
三、無(wú)梯度可能原因是:
1、標(biāo)準(zhǔn)品也污染,換標(biāo)準(zhǔn)品點(diǎn)板;
2、OD值不正常,控制溫度時(shí)間在做一次;
3、人為點(diǎn)板,不要點(diǎn)板。
四 線性不好可能原因是:
OD值不正常,控制溫度時(shí)間在做一次。
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